Цитогенетический метод

Пример родословной с легендой

Шведы Джо Тьйо и Альберт Левэн (Joe Hin Tjio and Albert Levan, 1956) установили, что в кариотипе H. sapiens 46 хромосом. Франсуа Лежэн (F. Lejeune, 1959) описал хромосомную этиологию болезни Дауна (трисомия по 21 паре хромосом). Т.о., 1956 год стал годом рождения цитогенетики человека. Значение метода исключительно велико. Он применяется при:

· Составлении карт хромосом;

· Изучении мутационного процесса;

· Исследовании хромосомного полиморфизма популяций человека;

· Решении эволюционных проблем;

· Диагностике “хромосомных болезней”.

Для получения препаратов митотических хромосом культивируют лимфоциты периферической крови в течение трёх суток в растворе питательной среды в присутствии фитогемагглютинина (ФГА, вещество, входящее в состав экстракта из проростков фасоли, стимулирующее деление клеток). Затем культуру клеток колхицинируют (0,01-0,02% раствор колхицина, препарата на основе Colchicum autumnale - безвременника).

Варианты окрашивания:

1. стандартное (рутинное), в качестве красителя используют орсеин или краситель Гимзы (Giemsa) – cмесь азура II и эозина; хромосомы окрашиваются однородно в первом случае в тёмно-пурпурный цвет, во втором – в тёмный;

2. дифференциальное (диффокраска), разработан Т. Касперссоном с соавт. в 1968-1970 годах; её варианты:

C – на конститутивный гетерохроматин (выявляются прицентромерные блоки),

G – в основном на интеркалярный гетерохроматин,

R – вариант ревертивный к G,

Q (от quinacrine – акрихин) – вариант флюоресцентного окрашивания.

Введение в практику использования дифференциального окрашивания хромосом имело революционное значение в цитогенетике млекопитающих и человека.

Дата добавления: 2014-01-20