Студопедия

КАТЕГОРИИ:


Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)

Спектрометрии. Противоопухолевый препарат фосфемид

Пример изучения метаболизма лекарств методами хромато-масс-


Фосфемид – N-пиримидил – 2-N/, N2 – ди(этилен)триамид фосфорной кислоты, обладаетвысокой противоопухолевой активностью как в эксперименте, так и в клинике. С целью более глубокого исследования механизма его действия проведено изучение его метаболизма на организме крыс. При хроматографировании на бумаге мочи опытных крыс, получивших внутривенно препарат, по сравнению с мочой контрольных крыс, наряду с пятном, соответствующем неизмененному препарату (фракция Ф-1) по подвижности имеется еще одно пятно. Газо-хроматическое изучение этих фракций показало, что они недостаточно летучи для анализа. Поэтому, для выделения искомых веществ, использован адсорбционный вариант высокоскоростной жидкостной хроматографии (ВЖХ). Схема выделения продуктов метаболизма и их биотрансформации:

 

Полученные фракции исследовались на масс-спектрометре, но из-за малого количества веществ никакие другие методы нельзя было применить.

 

В таблице представлены масс-спектры трех фракций:

Ф1 Ф2 Ф5
m/e І, %   m/e І, %   m/e І, %  
          1,4   - -   - - -   M+1 8,8 a) M 100 b)     M- N(CH2)2     183 – C2H2 183 - N(CH2)2   N(CH2)2                 1,3             M+2 M+1 1Cl M     M – Cl M – HCl   M – CH2Cl     212– HNCH2   c)   183 -N(CH2)2     d)     N(CH2)2             М+4 М+2 2Cl М     М – Cl     M – CH2Cl 262 – HCl   248-HNCH2   219 – HCl   c) d)

 

Cноски: a) – вещество содержит 8 атомов углерода,

b) – массе соответствует формула С8Н12N5PO, c) – 219 – HNCH2CH2,

d) – C4H5N3 – 2-аминопиримидин.

 

Из проделанной работы вытекает, что в снятой с соответствующего пятна на бумажной хроматограмме смеси веществ оказалось три фракции, выделить методом ВЖХ на указанных выше в схеме разделения сорбентах.

· Ф1 – исходный фосфемид, М соответствует его молекулярной формуле, М+1 – содержанию 8С, а также характерные ему фрагментарные ионы;

· Ф2 – имеет М на 36 единиц больше, чем Ф 1 и пики М, М+1 и М+2, характерные для вещества с 1 Сl.Следовательно, Ф2 образовалось путем присоединения HCl. Фрагментация вещества показывает, что оно имеет фрагменты -N и -NHCH2CH2Cl, т.е. при присоединении HCl раскрывается трехчленное кольцо.

· Ф3 имеет группу молекулярных ионов М, М+2, М+4, что характерно для веществ, содержащих 2 Cl. Ф3 тяжелее Ф1 на 2 HCl, т.е. Ф3 образуется путем присоединения к двум трехчленным циклам двух молекул HCl. Все это подтверждается его фрагментацией. Спектры всех трех веществ ниже пиков m/e = 184 – идентичны, что еще раз подтверждает его структуру.

Чтобы получить дополнительную информацию о строении веществ, они были продейтерированы методом обмена подвижных ионов (в D2O). Ниже показан масс-спектр вещества фракции Ф3 после его дейтерирования:


Приведенные данные показывают, что Ф3 имеет 3 подвижных водорода (в амидных NН группах), которые способны к обмену на дейтерий. По сути дела. реальное дейтерированное вещество – смесь 4-х соединений – ХН3, ХН2D, XHD2, XD3. Предложенные структуры были подтверждены встречным синтезом.

Задача расшифровки структуры продуктов метаболизма была обеспечена тем, что в результате трансформации в молекулу вводились постадийно 2 атома хлора, наличие которых очень легко определяется масс-спектрометрически.

Дальнейшие исследования показали, что введенный через вену фосфемид частично попадает в желудок, где и происходит последовательное присоединение HCl к этилениминным кольцам. Однако, эти исследования не позволили раскрыть механизм противоопухолевого действия фосфемида.

 

<== предыдущая лекция | следующая лекция ==>
Хромато-масс-спектрометрия | Приборы с традиционным способом регистрации спектра
Поделиться с друзьями:


Дата добавления: 2014-01-20; Просмотров: 482; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!


Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет



studopedia.su - Студопедия (2013 - 2024) год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! Последнее добавление




Генерация страницы за: 0.014 сек.