Количественное определение

Доброкачественность

1) Посторонние примеси (продукты разложения). Определяют спектрофотометрически. Пенициллины слабо поглощают в УФ-области, а продукты разложения хорошо. Анализируемый раствор должен быть свежеприготовленным, чтобы не допустить гидролиза.

2) Определяют удельное вращение.

3) Токсичность, пирогенность, стерильность, термостабильность.

4) Вода; допускается не более 5-8 %.

Проводится в 2 этапа: определяют сумму пенициллинов;

определяют индивидуальный пенициллин.

I. Сумма пенициллинов

Определяется химическими методами (йодометрия и алкалиметрия) и биологическими.

1) Йодометрия природных пенициллинов. Метод основан на том, что пенициллин в умеренно кислой или нейтральной среде (рН=4,5), которую создают ацетатным буфером, не вступает в реакцию с йодом, а в реакцию вступают только продукты гидролиза. К препарату прибавляют щелочь, оставляют на 20 минут в темном месте. Затем добавляют HCl.

Образуются пенальдиновая кислота и пеницилламин, которые окисляются раствором йода соответственно до дегидропенальдиновой и пеницилламиновой кислоты. Избыток йода оттитровывают раствором натрия тиосульфата. Э=М/8

I₂ + 2 Na₂S₂O₃ → Na₂S₄O₆ + 2 NaI

Индикатор крахмал. Параллельно проводят контрольный опыт.

Процентное содержание суммы природных пенициллинов рассчитывают по формуле:

, где

C – коэффициент пересчета стандартного образца натриевой соли бензилпенициллина на исследуемый бензилпенициллин: С=1 для Na соли;

C=1,045 для К соли;

С=1,652 для новокаиновой соли.

Э – это величина эквивалента 1 мл 0,01 н раствора йода в граммах стандартного образца Na соли бензилпенициллина (в пересчете на химически чистое вещество).

Величину Э используют только для Na соли бензилпенициллина и феноксиметилпенициллина.

а – навеска препарата, г. Рассчитывается исходя из ЕД.

Содержание суммы природных пенициллинов должно быть не менее 76 %.

2) Алкалиметрия полусинтетических пенициллинов. Метод основан на щелочном гидролизе пенициллинов при нагревании. Химизм см. выше. Затем титруют по фенолфталеину избыток щелочи раствором хлористоводородной кислоты. Э = М.м.

Метод может давать завышенные результаты, так как титруются примеси.

II. Индивидуальные пенициллины

1) Гравиметрия солей бензилпенициллина. Определяют бензилпенициллин в солях. Сначала его переводят в осадок с помощью N-этилпиперидина. Этот осадок не растворим в смеси амилацетата и ацетона, а соли других пенициллинов растворимы. Осадок отфильтровывают, сушат, взвешивают.

2) Микробиологический метод (воспроизводимость 5-10 %). Определяют по действию исследуемого пенициллина и пенициллина-стандарта с известной концентрацией на определенный штамм микроорганизмов. Сравнивают угнетение роста тест-микроорганизма исследуемым пенициллином и угнетение роста известными концентрациями стандарта. 1 ЕД соответствует 0,6 мкг химически чистой Na соли бензилпенициллина.

3) СПФ для природных и полусинтетических пенициллинов основана на гидролизе в кислых буферных растворах до бензилпеницилленовой кислоты. Примеси не мешают определению.

4) ФЭК на основе цветных реакций (гидроксамовая проба, ауриновый краситель).

5) Бензилпенициллина новокаиновая соль количественно определяется по новокаину нитритометрически. Новокаина должно быть 37,5-40,5 %.

Бензатин анализируют методом кислотно-основного титрования в неводной среде по дибензилэтилендиамину после экстрагирования эфиром из щелочного раствора препарата. Титруют хлорной кислотой в среде ледяной уксусной кислоты. Аналогично определяют ампициллин по алифатической аминогруппе. Феноксиметилпенициллин титруют метилатом натрия в среде ДМФА.

Дата добавления: 2014-01-20