Студопедия

КАТЕГОРИИ:


Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)

Иммерсионные системы




Ультрафиолетовый микроскоп

 

Как видно из формулы (1), один из способов уменьшения предела разрешения микроскопа - использование света с меньшей длиной волны. В связи с этим применяют ультрафиолетовый микроскоп, в котором микрообъекты исследуются в ультрафиолетовых лучах. Принципиальная схема оптическая такого микроскопа аналогична схемам обычного микроскопа. Основное отличие заключается, во-первых, в использовании оптических устройств, прозрачных для УФ света, и, во-вторых, в особенности получения изображения. Т.к. глаз непосредственно не воспринимает этого излучения, то употребляются фотопластинки, люминесцентные экраны или электронно-оптические преобразователи.

 

Вопрос 4. 8 минут

 

Дальнейшим усовершенствованием микроскопа явилось применение иммерсионного объектива. Так называют объектив, у которого пространство между предметом (покровным стеклом препарата) и входной линзой заполняется жидкой средой - иммерсией - с показателем преломления, близким к стеклу, например, глицерином (n = 1,45) или монобромнафталином (n = 1,65). При иммерсионном объективе, во-первых, значительно увеличивается яркость изображения и, во-вторых, повышается разрешающая способность микроскопа.

 
 

 


При иммерсии свет от предмета до объектива проходит по оптически однородной среде и не дает потерь на отражение. Это значительно повышает яркость изображения, что имеет существенное значение особенно для микроскопа с большим увеличением. Для микроскопа с увеличением в 400 раз площадь изображения по сравнению с площадью предмета увеличивается в 160 000 раз, во столько же раз уменьшается его яркость по сравнению с яркостью предмета.

В иммерсионном объективе, где между предметом и объективом находится среда с показателем преломления n, длина волны света, проходящего в объектив, ln= l / n, где l - длина волны света в воздухе. Подставляя эти данные в формулу для предела разрешения, получим:

 

Z = ln / 2sin(Q /2) = l / 2n sin(Q /2)

 

т.е. предел разрешения иммерсионного объектива при наклонном освещении предмета числено равен отношению длины волны света к удвоенному произведению показателя преломления иммерсионной среды на синус апертурного угла объектива.

Величина А = sin(Q /2) для сухого или Аn = n sin(Q /2) для иммерсионного объектива называется численной (числовой) апертурой и для сухого объектива обозначается на оправе вместе с увеличением. Поэтому можно сказать, что предел разрешения микроскопа равняется длине волны света, при котором производится наблюдение, деленной на численную апертуру при перпендикулярном падении света на предмет:

 

Z = l / A,

 

или деленной на удвоенную численную апертуру при наклонном освещении:

 

Z = l / 2A;

 

при иммерсионном объективе Z = l / 2n A.

Числовая апертура объектива, характеризуя предел разрешения, позволяет сравнить между собой разрешающую способность различных микроскопов. Последняя тем выше, чет больше апертура.

Максимальный апертурный угол может быть порядка 700, тогда для сухого объектива ему соответствует числовая апертура А= sin700 = 0,94; Z» 0,30 мкм.

Для иммерсионного объектива при n = 1,5

Аn = 1,5 0,94 = 1,4; Z»0,19 мкм.

Данные приведены для наклонного падения света на объект и наиболее чувствительной глазу длины волны 0,555 мкм.

 

Вопрос 5. 5 минут

Полезное увеличение

 

Таким образом, в оптическом микроскопе разрешаются объекты размером не менее 0,2 - 0,3 мкм. Для того, чтобы эти объекты были различимы также и глазом, увеличение Км микроскопа должно быть не меньше величины, определяемой соотношением пределов разрешения Zглаза и микроскопа Zм: Km = Zгл / Zм, подставляя в эту формулу значение Z, получим

 

Km = 2A Zгл / l.

 

Zглаза (на расстоянии наилучшего зрения) в интервале 2 - 4 равно от 140 до 280 мкм. Подставляя их, а также l= 0,555 мкм в формулу, находим интервал значений полезного увеличения микроскопа: 500А < Kм < 1000А. Эти увеличения называют полезными, т.к. при них глаз различает все элементы структуры объекта, которые разрешимы микроскопом. Подставляя числовую апертуру иммерсионной системы с маслом (n = 1,43) в формулу, получим следующее неравенство для полезных увеличений такого микроскопа: 700 < Kм < 1400.

 

Вопрос 6. 9 минут

Специальные приемы микроскопии:

измерение размеров малых объектов,

микропроекция, микрофотография,

метод фазового контраста,

метод темного поля (ультрамикроскопия).

 

1. Измерение размеров малых объектов.

Определение величины микроскопируемого предмета делается с помощью нанесенных на стеклянную пластинку масштабных шкал, называемых окулярным и объектным микрометрами.

Окулярный микрометр помещают между линзами окуляра так, чтобы его шкала находилась в плоскости промежуточного изображения, образуемого объективом, При этом в окуляр наблюдается изображение шкалы, совмещенное с изображением микроскопируемого предмета. Учитывая цену деления шкалы микрометра, можно определить размер этого изображения, даваемого объективом, а разделив полученные данные на известное увеличение объектива Коб - действительные размеры предмета.

Если цена деления окулярного микрометра неизвестна, то ее можно определить с помощью объектного микрометра с известной ценой деления (обычно 0,01 мм). Объектный микрометр помещается на место препарата и в окуляр наблюдается совмещенное изображение обеих шкал.

2. Микропроекция и микрофотография.

Мнимый характер изображения в микроскопе обусловлен тем, что промежуточное действительное изображение, образуемое объективом, располагается ближе переднего фокуса окуляра. Если это условие нарушить, например, перевернуть окуляр так, что изображение, которое дает объектив, окажется дальше фокусного расстояния окуляра, то последний будет давать действительное изображение, которое может быть спроецировано на экран или фотопленку. Способ наблюдения на экране действительного изображения предмета называется микропроекцией. Обычно при этом микроскоп ставят горизонтально и предмет освещают сильным источником света.

Фотографирование полученного таким образом действительного изображения называется микрофотографией. Обычно при этом употребляется специальная фотонасадка к микроскопу, которая представляет собой фотокамеру, надеваемую на окулярный конец тубуса микроскопа.

3. Метод фазового контраста.

Метод применяется для наблюдения мало контрастных объектов; он основан на использовании разности фаз, которая образуется при прохождении света через различные структуры исследуемого объекта.

4. Метод темного поля (ультрамикроскопия).

Это метод микроскопии нефиксированных и неокрашенных объектов. Наблюдение таких объектов в проходящем света не дает желаемых результатов вследствие отсутствия контраста между элементами структуры объекта, а также между объектом и окружающей средой. В этих случаях используется метод наблюдения в темном поле, который осуществляется путем применения в обычном биологическом микроскопе особого конденсора.

 

 

Ход лучей в проекционном микроскопе.

 
 

 


Вопрос 7. 9 минут

 




Поделиться с друзьями:


Дата добавления: 2014-01-14; Просмотров: 1645; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!


Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет



studopedia.su - Студопедия (2013 - 2024) год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! Последнее добавление




Генерация страницы за: 0.023 сек.