Методы выделения, фракционирования и очистки белков

Ренатурация белков

В некоторых случаях денатурация обратима. Так, например, кратковременное воздействие спирта или ацетона вызывает в верхнем слое белковой молекулы перераспределение ионных и водородных связей и частичную денатурацию. После быстрого удаления спирта, ацетона происходит самопроизвольное восстановление этих связей в водной фазе.

Денатурирующее воздействие мочевины на белок можно также снять путем ее удаления (диализом или гемодиализом – искусственная почка). Мочевина образует водородные связи с атомами пептидных групп, т.е. встраивается во вторичную структуру:

При нарушении функции почек в крови повышается концентрация мочевины, она поступает в клетки (ткани) и вызывает токсическое действие. Несбалансированное с углеводами белковое питание сопровождается накоплением мочевины в крови и тканях, поскольку аминокислоты, вставшие на путь окисления (энергетический обмен), дезаминируются с отщеплением аммиака.

Процедура выделения какого-либо белка начинается с переведения белков ткани в раствор.

Чтобы избежать денатурации белка в процессе его выделения все операции проводят в «мягких» условиях – при низкой температуре (не выше +5 ^оС), избегая действия химических реагентов способных изменить его структуру, физико-химические свойства и биологическую активность.

Дата добавления: 2014-11-16