Определение иммунотоксичности ксенобиотиков

Стратегия определения иммунотоксичности состоит в последовательном изучении в эксперименте состояния элементов иммунной системы (от клетки до целостного организма), в условиях воздействия испытуемого токсиканта. Ни одна отдельно взятая методика не является в полной мере надежной и достаточной для оценки потенциальной опасности ксенобиотика. Содержание одного из пакетов тестов представлено в таблице 10.

Таблица 10. Двухэтапный пакет тестов оценки иммунотоксичности ксенобиотика

Этап	Параметры	Методы исследования
1. Этап скрининга	Иммуноморфология   Гуморальный иммунитет     Клеточный иммунитет   Неспецифическая резистентность	Гематологические: общий анализ крови, формула крови; Вес тела, селезенки, тимуса, почек, печени, легких; Гистология: селезенки, тимуса, лимфатических узлов Подсчет колоний клеток, образующих IgM к Т-зависимым и Т-независимым антигенам и ответ на митогены Ответ на действие митогена и смешанный лейкоцитарный ответ на аллогенные лейкоциты Фагоцитарная активность клеток
2. Этап изучения механизмов	Морфология   Гуморальный иммунитет   Клеточный иммунитет   Неспецифический иммунитет Оценка резистентности организма	Подсчет числа В- и Т-лимфоцитов в селезенке Подсчет колоний клеток, образующих IgG к Т-зависимым антигенам Функции цитотоксических лимфоцитов; Количество перитонеальных макрофагов и анализ их функциональной активности Прививка опухолевых тканей: саркома PYB6 меланома B6F10 Бактериальные модели: Listeria monocytogenes Streptococcus spp Паразитарные модели: Trypanosoma musculi Plasmodium yoellii Вирусные модели: вирус гриппа

Исследования первого этапа предназначены для выявления потенциальных иммунотоксикантов. Тесты второго этапа позволяют установить механизм иммунотоксичности и потенциальную способность вещества нарушать общую резистентность организма. Обычно токсикант вводится мышам в течение 14 дней, хотя в случае неясных результатов введение может быть продолжено до 30 и даже 90 суток.

Для изучения иммуносупрессорных свойств токсикантов в лабораторных условиях могут быть применены животные, зараженные патогенными микроорганизмами. С целью инфецирования используют: Listeria monocytogenes, Streptococcus pneumonia, Trypanosoma musculi, Plasmodium yoellii, вирус гриппа, вирус герпеса простого и т.д. В подобного рода исследованиях удаётся оценить состояние отдельных элементов иммунной системы. Продолжительность анализа - 2 - 3 недели.

Примером хорошо отработанного теста на иммунотоксичность ксенобиотика, является метод введения мышам, подвергшимся действию токсиканта, культуры трипаносом (trypanosoma musculi). Эти трипаносомы являются непаразитическими, экстрацеллюлярными микроорганизмами. Поражение мышей этими организмами на ранних этапах заражения контролируется врожденными механизмами резистентности, в частности фагоцитозом. В поздние стадии (10 дней инфекционного процесса) паразитемия контролируется механизмами антителообразования. Конечный этап (18 - 20 день) инфекционного процесса проходит под контролем как клеточного, так и гуморального иммунитета. Таким образом, в одном эксперименте можно определить влияние ксенобиотика на несколько элементов иммунной реакции (фагоцитоз, выработку антител, клеточный иммунитет). Вызванные токсикантом повреждения фагоцитоза, либо антителообразования, либо механизмов клеточного иммунитета, проявляются паразитемией в соответствующем периоде развития инфекции. Эта модель достаточно чувствительна и эффективна при оценке иммуносупрессорных свойств ксенобиотиков.

Оценка потенциальной способности веществ сенсибилизировать организм проводится в опытах на лабораторных животных, как правило, на морских свинках. В настоящее время используются три группы тестов: Draize; Buehler; Magnusson-Kligman. Тесты различаются способами введения токсикантов: внутрикожное, накожное и подкожное, соответственно; используемыми в исследовании адъювантами, промежутками времени между сенситизацией и провокацией реакции. В настоящее время как наиболее специфичный и точный рассматривается тест Magnusson-Kligman. С методикой проведения исследований можно познакомиться в специальной литературе.

Дата добавления: 2014-12-08