КАТЕГОРИИ: Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748) |
Неспецифічні мітогени лімфоцитівРеакція бластної трансформації лімфоцитів Дослідження функціонального стану лімфоцитів Оцінку кількості субпопуляцій лімфоцитів бажано доповнювати функціональними тестами. У клінічних імунологічних лабораторіях досліджують інтенсивність проліферативної відповіді лімфоцитів на мітогени Т- та В-клітин, а також синтез мононуклеарами периферичної крові низки цитокінів. Відомо, що низка речовин чинить на лімфоцити ссавців мітогенну дію і викликають їх перетворення на більш молоді, бластні форми (таблиця.).
Таблиця
Найчастіше для оцінки функціонального стану Т-лімфоцитів використовують ФГА - рослинний лектин, який одержують з квасолі. У ході реакції мононуклеарні лімфоцити, виділені з периферичної крові методом градієнтного центрифугування, культивують за присутності ФГА протягом 72 годин. Результати реакції можна обрахувати двома методами: 1) морфологічним; 2) за включенням радіоактивної мітки. Морфологічний метод: з культури клітин готують мазки та фарбують за Романовським-Гімзою. У світловому мікроскопі з імерсійною системою визначають відсоток бластів щодо загальної кількості лімфоцитів. Результат може бути виражений також у вигляді індексу стимуляції, що являє собою відношення відсотка трансформованих клітин у культурі з ФГА до відсотка трансформованих клітин у культурі без ФГА. Облік результатів за включенням радіоактивної мітки є зручним для потужних лабораторій. Принципово відмінним є те, що за 4 - 6 годин до закінчення культивування у лунки вносять 3Н-тимідин. Рівень включення радіоактивної мітки оцінюють на сцинтиляційному електрофотометрі. Результати виражають у імпульсах за хвилину або у вигляді індексу стимуляції. Особливим значенням вирізняються показники спонтанного та індукованого включення 3Н- тимідину. Підвищення спонтанного рівня проліферації можна трактувати як свідчення наявності ендогенного вогнища стимуляції лімфоцитів, наприклад аутоантигенів, суперантигенів або активних метаболітів. При проведенні оцінки індукованої проліферації більш інформативним є данні,що свідчать про подавлення відповіді на мітоген. При цьому важливо мати на увазі як абсолютну кількість включень тритію, так і індекс стимуляції. Перший показник відображає максимальні можливості літогенезу лімфоцитів, другий власне відповідь на мітогенний стимул. Ці показники знижуються при різних видах імунодефіцитів, як первинних, генетично обумовленних, так і вторинних. Цитофлюрометрична оцінка проліферації та фаз клітинного циклу, що заснована на визначенні вмісту в клітинах ДНК: Для мітотичного ділення клітин необхідна реплікація ДНК. При вступі в клітинних цикл вміст ДНК зростає, а після мітозу повертається до вихідного рівня, що відповідає диплоїдному набору хромосом. Ці показники можуть використовуватись для діагностики імунодефіцитів та для контроля ефективності лікування імуномодулюючими речовинами.
Дата добавления: 2014-12-17; Просмотров: 714; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы! Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет |