Изучение культуры

Изучение культуры

1. Отметить наличие аммиака и сероводорода (изменение цвета индикаторных бумажек).

2. Из нижних слоев жидкости выполнить мазок, приготовить постоянный препарат.

3. Микроскопировать с иммерсионной системой. Отметить наличие и расположение спор.

На мазках преимущественно выявляются бактерии p.Clostridium.

Работа 26. Фиксация атмосферного азота микроорганизмами

Оборудование: колбы 100-150 мл, почва, питательная среда: водопроводная вода – 100 мл, маннит – 2 г, К₂НРО₄ – 0,02 г, СаСО₃ – 0,5 г; микроскоп, предметные и покровные стекла, клубеньки с корней бобовых растений, бритвы, красители (кристаллвиолетт, фуксин), спиртовка, петли, иммерсионное масло.

Ход работы

Закладка элективной культуры азотобактера

1. Приготовить элективную питательную среду указанного состава.

2. Разлить среду в колбы слоем в 1-2 см. Заразить комочком почвы.

3. Закрыть неплотно ватными пробками (аэробные условия).

4. Инкубировать при комнатной температуре в течение 7-10 дней до развития на поверхности жидкости сероватой пленки.

1. Приготовить препарат «раздавленная капля» и изучить его, пользуясь объективом х 40. При изучении окрасить на выявление капсулы.

2. Приготовить фиксированный окрашенный препарат. Изучить, пользуясь иммерсионной системой.

При микроскопировании обнаруживаются крупные круглые клетки p. Azotobacter, покрытые слизистой капсулой, часто сдвоенные (рис. 14).

3. Зарисовать наблюдаемые формы.

Рис. 14. Азотобактер:

1 – одиночные и двойные клетки с капсулами; 2 – сарцинная форма капсулой

Изучение клубеньковых азотфиксирующих бактерий p. Rhyzobium

1. Выполнить тонкий срез через клубенек с помощью острой бритвы.

2. Приготовить препарат «раздавленная капля», окрасить фуксином.

3. Микроскопировать, пользуясь объективом х 40.

4. Отжать каплю сока из разрезанного клубенька на предметное стекло.

5. Выполнить мазок, приготовить фиксированный препарат, окрашенный кристаллвиолеттом.

6. Микроскопировать, используя иммерсионную систему.

На препаратах выявляются прямые и изогнутые палочки p. Rhyzobium.

Рис. 15. Клубеньковые бактерии: 1 – фасоли, 2 – клевера

Работа 27. Процесс нитрификации

Оборудование: питательные среды С.Н. Виноградского:

для первой фазы нитрификации:	для второй фазы нитрификации:
вода – 100 мл (NH4)2SO4 – 0,2 г K2HPO4 – 0,1 г MgSO4(·7H2O) – 0,05 г NaCl – 0,2 г FeSO4(·7H2O) – 0,4 г CaCo3 – 0,5 г	вода – 100 мл NaNO2 – 0,1 г Na2CO3 – 0,1 г NaCl – 0,05 г K2HPO4 – 0,05 г MgSO4(·7H2O) – 0,03 г FeSO4(·7H2O) – 0,04 г CaCo3 – 0,5 г

стерильные колбы на 1000150 мл, ватные пробки, мел, почва, реактив «цинк-йод-крахмал», разбавленная серная кислота (1 часть H₂SO₄ + 3 части воды или 1 капля H₂SO₄ на 5 капель воды), H₂SO_4конц, дифениламин, фарфоровая палетка, микроскоп с иммерсионной системой, фуксин, спиртовка, предметные стекла.

Ход работы

Закладка элективных культур первой и второй фаз нитрификации

1. Приготовленные питательные среды разлить в колбы слоем 0,5-1 см.

2. Заразить комочком почвы, закрыть ватной пробкой.

3. Инкубировать в термостате при t = 25-28ºС в течение 15-20 суток.

Дата добавления: 2014-12-17