Студопедия

КАТЕГОРИИ:


Загрузка...

Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)

Методы розеткообразования




Это первые методы, позволившие иммунологам определить содержание Т- и В-лимфоцитов человека в период, когда отсутствовали необходимые моноклональные антитела для выявления этих клеток. Но тем не менее эти методы все еще находят применение в диагностических целях.

 

Метод спонтанного розеткообразования основан на том, что на поверхности всех Т-лимфоцитов человека содержится белок-рецептор для бараньих эритроцитов. На В-лимфоцитах таких рецепторов нет. Инкубируя взвесь лимфоцитов периферической крови с бараньими эритроцитами, получают структуры, называемые “розетками”: в центре Т-лимфоцит, по периферии – прикрепленные к его поверхности бараньи эритроциты. Т-лимфоциты, выявляемые с помощью этого теста, обозначают еще Е-РОК (где Е-эритроцит барана, РОК – розеткообразующая клетка). Позднее было установлено, что рецептором к бараньим эритроцитам является белок CD2 – общий маркер всех Т-лимфоцитов человека.

 

 


Таблица 26. Ориентировочный набор современных методов оценки врожденного и адаптивного иммунитета

 

Методы оценки состояния врожденного иммунитета Методы оценки состояния адаптивного иммунитета
Количественные качественные количественные качественные
1. Проточная цитометрия (выявление количества определенных клеток врожденной иммунной системы) 1. определение фагоцитар-ного индекса 2. определение фагоцитарного числа 3. НСТ-тест 4. ИФА (определение цитокинов, хемокинов, компонентов комплемента и т.д.) 1. Проточная цитофлуори-метрия (определение попу-ляций и субпопуляций лим-фоцитов) 2. Иммунофлуоресцентный метод (определение поверх-ностных иммуноглобулинов и субпопуляций лимфоци-тов с помощью люминес-центной микроскопии) 3.Методы розеткообразова-ния (определение содержа-ния Т- и В-лимфоцитов: Е-РОК, м-РОК, ЕА-РОК, ЕАС-РОК) 1. Проточная цитофлуори-метрия (определение экс-прессии рецепторов для ци-токинов и других рецепто-ров на различных субпопу-ляциях лимфоцитов и др.) 2. РБТЛ (реакция бластной трансформации лимфоци-тов) 3. РТМЛ (реакция торможе-ния миграции лейкоцитов) 4. ИФА (определение сыво-роточных и секреторных иммуноглобулинов, уровня цитокинов, растворимых рецепторов для цитокинов и др.) 5. кожные пробы 6. РАСТ (радиоаллергосор-бентный тест)

 


Аналогичный метод применяется при оценке количества В-лимфоцитов, в нем используется взаимодействие эритроцитов, нагруженных антителами к этим эритроцитам, с Fc-рецепторами В-лимфоцитов (ЕА-розетки: эритроциты, антитела).

Используют также метод ЕАС-розеткообразования (эритроциты, антитела и комплемент). В этом случае бычьи эритроциты, соединенные с антителами и комплементом, способны взаимодействовать с Fc- и С3- рецепторами В-лимфоцитов, также формируя розетки. Схематически тесты розеткообразования представлены на рис. 52.



 

   

 

Рисунок 52. Методы розеткообразования (слева – Е-РОК,

справа – ЕА-РОК)

Недостатки этих методов: неоднозначность трактовки результатов (они зависят от условий постановки реакций, качества реагентов, определяются состо­янием не только маркерных молекул, но и цитоскелета и др.), трудности, связанные с их стандартизацией и автоматизацией.

 





Дата добавления: 2014-11-29; Просмотров: 784; Нарушение авторских прав?;


Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет



ПОИСК ПО САЙТУ:


Читайте также:



studopedia.su - Студопедия (2013 - 2017) год. Не является автором материалов, а предоставляет студентам возможность бесплатного обучения и использования! Последнее добавление ip: 54.156.78.4
Генерация страницы за: 0.006 сек.