Реакция с солью железа (II)

К 1 мл извлечения добавляют 1 мл раствора гидрокарбоната натрия и 1 мл сульфата железа (II). Наблюдают образование аскорбината железа фиолетового цвета.

4. Реакция с раствором нитрата серебра. При этом происходит вос становление серебра, а аскорбиновая кислота окисляется в кетоформу.

К извлечению прибавляют 1 мл раствора нитрата серебра, при этом выпадает осадок металлического серебра.

Задание 3. Методика хроматографического определения аскорбиновой кислоты в плодах шиповника

Методика

1. В ступке измельчают 0,5 г плодов шиповника, заливают 5 мл воды, перемешивают, оставляют на 15 мин и фильтруют.

2. Полученное извлечение наносят капилляром на пластинку (один капилляр), рядом как свидетель наносят чистую аскорбиновую кислоту.

3. Пластинку помещают в хроматографическую камеру с системой растворителей этилацетата - ледяная уксусная кислота (80:20).

4. Хроматографирование ведут 20 мин (пробег растворителя 13 см), после чего хроматограмму высушивают на воздухе и обрабатывают парами йода.

5. Рассчитывают значение Rf исследуемого вещества и свидетеля и делают вывод о содержание аскорбиновой кислоты в исследуемом извлечении.

Задание 4. Методика хроматографического определения каротиноидов в плодах рябины обыкновенной

Методика

1. 1 г измельченных плодов рябины заливают 5 мл хлороформа в колбе вместимостью 25 мл, экстрагируют 1,5 часа.

2. Фильтруют и полученное извлечение и наносят капилляром на пластинку.

3. Помещают в одну из систем: бензол – этанол (80:20); циклогексана - эфир (80:20).

4. Хроматограмму высушивают на воздухе и обрабатывают 10% раствором фосфорномолибденовой кислоты в этиловом спирте. После прогревания пластинки при температуре 60 – 80 °С каротиноиды проявляются в виде пятен синего цвета на желто-зеленом фоне.

5. Рассчитывают значение Rf исследуемого вещества и раствора свидетеля и делают вывод о содержание каротиноидов в исследуемом извлечении.

Задание 5.Количественное определение аскорбиновой кислоты

Определите количественное содержание кислоты аскорбиновой в плодах шиповника по методу, предложенному в ГФ XI (ст.38). Сделайте вывод о соответствии содержания кислоты аскорбиновой в анализируемом сырье требованиям ГФ XI.

Данный метод используется в Государственной Фармакопеи при определении содержания витамина С в плодах шиповника

1. Из грубо измельченной аналитической пробы плодов берут навеску массой 20 г, помещают ее в фарфоровую ступку и тщательно растирают со стеклянным порошком (около 5 г), постепенно добавляя 300 мл воды, и настаивают 10 мин.

2. Затем смесь размешивают и извлечение фильтруют.

3. В коническую колбу вместимостью 100 мл вносят 1 мл полученного фильтрата, 1 мл 2 % раствора хлористоводородной кислоты, 13 мл воды, перемешивают и титруют из микробюретки раствором 2.6-дихлорфенолиндофенолята натрия (0,001 моль/л) до появления розовой окраски, не исчезающей в течение 30—60 секунд. Титрование продолжают не более 2 мин.

4. *В случае интенсивного окрашивания фильтрата или высокого содержания в нем аскорбиновой кислоты [расход раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия (0,001 моль/л) более 2 мл], обнаруженного пробным титрованием, исходное извлечение разбавляют водой в 2 раза или более.

5. Содержание аскорбиновой кислоты в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

0,000088 — количество аскорбиновой кислоты, соответствующее I мл раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия (0,001 моль/л), в граммах;

V— объем раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия (0,001 моль/л), пошедшего на титрование, в миллилитрах;

т — масса сырья в граммах;

W — потеря в массе при высушивании сырья в процентах.

Примечания.

Приготовление раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолнта натрий (0,001 моль/л): 0,22 г 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия растворяют в 500 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды при энергичном взбалтывании (для растворения навески раствор оставляют на ночь). Раствор фильтруют в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки. Срок годности раствора не более 7 суток при условии хранения в холодном, темном месте.

Установка титра. Несколько кристаллов (3—5) аскорбиновой кислоты растворяют в 50 мл 2 % раствора серной кислоты; 5 мл полученного раствора титруют из микробюретки раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия до появления розового окрашивания, исчезающего в течение 1 -2 нед.

Другие 5 мл этого же раствора аскорбиновой кислоты титруют раствором калия йодата (0,001 моль/л) в присутствии нескольких кристаллов (около 2 мг) калия йодида и 2—3 капель раствора крахмала до появления голубого окрашивания.

Поправочный коэффициент (К) вычисляют по формуле:

, где

V— объем раствора калий йодата (0,001 моль/л), пошедшего на титрова­ние, в миллилитрах

V₁— объем раствора 2.6-дихлорфенолиндофенолята натрия, пошедшего на титрование, в миллилитрах.

После выполнения экспериментов заполните следующую таблицу

1. Качественные реакции на аскорбиновую кислоту
Название реакции	Реактивы	результат
1)
2)
3)
4)
2. Хроматографическое исследование извлечений
Вид извлечения	Хромато- Графическая система	Расстояние от линии старта до пятна	Расстояние от линии старта до фронта растворителя	Rf
3. Количественное определение аскорбиновой кислоты
Метод	Данные нормативной документации	Полученный результат

Дата добавления: 2014-12-27