Лабораторная работа

Тесты для самоконтроля подготовки к практическому занятию.

Оформить лабораторную работу

Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний.

Вопросы, изученные на предшествующих дисциплинах и необходимые для освоения темы.

Количественными характеристиками обмена аминокислот

• Концентрация аммиака в сыворотке крови: 0,04-0,07 мг/дл (25-40 мкмоль/л)

• Концентрация мочевины в сыворотке крови: 15-50 мг/дл (2,5-8,4 ммоль/л)

• Суточное выведение мочевины: 25 г/сут

• Активность АЛТ и АСТ в сыворотке крови здоровых людей: 5-40 МЕ/л

общая химия, биоорганическая химия: аммиак и соли аммония как соединения азота;мочевина — конечный продукт азотистого обмена в организме человека; структура и свойства мочевины, виды азотемии, формулы циклических аминокислот.

Для полного усвоения темы необходимо повторить из биологической химии: ферменты классов трансфераз и оксидоредуктаз, витамин В₆ (коферментная форма).

Задания для самостоятельной подготовки к практическому занятию:

1. Пути образования пула а минокислот в крови и его использование в организме.

2. Общие реакции обмена аминокислот: реакции переаминирования, тканевые особенности.

3. Трансаминазы (аминотрансферазы) АЛТ и АСТ. Роль витамина В₆ в реакциях переаминировани.

4. Значение АЛТ и АСТ для энзимодиагностики

5. Общие реакции обмена аминокислот: прямое и непрямое дезаминирование, тканевые особенности.

6. Общие реакции обмена аминокислот: декарбоксилирование, тканевые особенности. Роль витамина В₆ в этих реакциях.

7. Пути использования безазотистого остатка аминокислот: глюконеогенез, кетогенез, ЦТК.

8. Образование и Роль биогенных аминов в организме (гистамина, триптамина, серотонина, -аминомасляной кислоты).

9. Реакции использования и обезвреживания аммиака: образование глутамина, аспарагина, мочевины - тканевые особенности.

10. Глюкозо-аланиновый цикл, значение в обезвреживании аммиака и поддержания уровня глюкозы в крови

11. Связь орнитинового цикла с обменом аминокислот и энергетическим обменом.

12. Недостаточность ферментов орнитинового цикла, причины и последствия.

13. Механизмы острой и хронической токсичности аммиака, метаболические и клинические последствия.

1. Выберите правильный ответ. Пациент находится в клинике. При лабораторном исследовании установлено: уровень мочевины сыворотки крови – 1,5 ммоль/л, а содержание её в моче – 200 ммоль/л. Укажите вероятную причину.

А) нарушение клубочковой фильтрации

Б) снижение почечной реабсорбции

В) отрицательный азотистый баланс

Г) гиповитаминоз

Д) печёночная недостаточность.

2. Выберите правильный ответ. Цитруллинемия проявляется рвотой, нарушением сознания, судорогами. Наследственный дефект какого из ферментов орнитинового цикла является причиной указанных нарушений:

А) карбомоилфосфатсинтетазы

Б) орнитинкарбомоилфосфаттрансферазы

В) аргининосукцинатсинтетазы

Г) аргининосукцинатлиазы

Д) аргиназы

Е) аденозиндезаминазы.

3. Выберите несколько правильных ответов. Пути образования аммиака:

1) дезаминирование аминокислот,

2) дезаминирование биогенных аминов,

3) дезаминирование мочевины,

4) дезаминирование нуклеотидов,

5) дезаминирование амидов глутамина и аспарагина.

4. Выберите несколько правильных ответов. Общие пути катаболизма аминокислот:

1) дезаминирование,

2) декарбоксилирование,

3) превращения углеводородного скелета,

4) трансаминирование,

5) трансметилирование.

5. Выберите несколько правильных ответов. Пиридоксальфосфат является коферментом процессов:

1) трансаминирования аминокислот,

2) синтеза полипептидов,

3) гликолиза,

4) декарбоксилирования аминокислот,

5) β-окисления жирных кислот.

Ориентировочная основа действия для проведения самостоятельной работы студентов в учебное время.

Определение мочевины в биологических жидкостях ферментативно (НОВОКАРБ)

Принцип метода: Мочевина под действием уреазы разлагается на углекислый газ и аммиак, последний в реакции с салиацилатом натрия и гипохлоритом натрия в присутствии нитропруссида натрия образует окрашенный продукт, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации мочевины в пробе.

Меры предосторожности: Р₃ содержит едкие вещества. При попадании его на кожу – тотчас смыть большими количеством воды. При работе с сывороткой крови необходимо надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки.

Порядок выполнения работы:

Реагенты	Опытная проба	Калибровочная проба
1. Рабочий реагент №1	0,25 мл	0,25 мл
2. Исследуемый материал: - кровь (сыворотка) - моча (разведение 1:100)	0,01 мл 0,01 мл	- -
3. Калибратор (раствор мочевины 5,0 ммоль/л)	-	0,01 мл
Пробирку встряхнуть, перемешать, выдержать 5 мин при 37^о С
4. Рабочий реагент №2	1 мл	1 мл
5. Рабочий реагент №3	1 мл	1 мл
Пробирку встряхнуть, перемешать, выдержать 5 мин при 37^о С
Определить оптическую плотность опытной (Аоп) и калибровочной пробы (Ак) против Н2О на ФЭК при красном светофильтре (длина волны 610-640 нм), кювета 5 мм

Расчет Концентрацию мочевины в крови (моль/л) определяют по формуле: Х= (А_оп: А_к) × 5,0

Норма: 3 – 8 ммоль/л

Концентрацию мочевины в моче (моль/сут) определяют по формуле: Х= (А_оп: А_к) × 5,0 × 100 × 1,5,

где 100 – коэффициент разбавления мочи; 1,5 л – среднесуточное количество мочи

Норма: 333 – 583 ммоль/сут ( 20-35 грамм/сут)

Клинико-диагностическое значение. МОЧЕВИНА - конечный продукт метаболизма белков, синтезируется в печени, удаляется посредством клубочковой фильтрации. За сутки образуется 20-30 г М., 50-60% выделяется, 40-50% реабсорбируется. При патологии сдвиги в уровне мочевины крови зависят от соотношения процессов мочевинообразования и ее выделения. Снижение уровня мочевины в крови особого диагностического значения не имеет. Увеличение связано с усиленным катаболизмом белков (лихорадочное состояние, голодание, гипертиреоз и др.), обезвоживанием (рвота, понос) и нарушением выделительной функции почек (гломерулонефриты, хронические пиелонефриты, нефросклерозы, синдром раздавливания, гидронефроз), задержкой выделения мочи (камень, простаты). При развитии острой почечной недостаточности мочевина крови достигает высоких концентраций - 133-150 ммоль/л. Выведение мочевины с мочой пропорционально содержанию белка в рационе питания, а также с ростом метаболизма эндогенных белков. Уменьшение выведения М. имеет место в период роста, во время беременности, заболеваниях печени (нарушение синтетической функции), заболеваниях почек (одновременный рост мочевины в крови), прием анаболических гормонов (гормон роста, тестостерон, инсулин и др.). Увеличение выведения сопровождает усиленный катаболизм белков (послеоперационное состояние, гиперфункция щитовидной железы и др.). Норма (сыворотка) - 2,5-8,3 ммоль/л; (моча) - 430-710 ммоль/сут (24-40 г/сут.).

Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время.

І. Вопросы для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время

Ответить на каждый вопрос однозначно: «да» или «нет»

1. Реакции трансаминирования аминокислот необратимы.

2. В процессах дезаминирования и транаминирования аминокислот участвует α-кетоглутаровая кислота.

3. Коферентом аминотрансфераз служит ФАД.

4. В процессе трансаминирования выделяется аммиак.

5. Возможно ли превращение пировиноградной кислоты в аланин в организме человека?

6. Является ли фенилаланин предшественником серотонина?

7. Используют ли определение активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови человека для диагностики инфаркта миокарда?

8. Нужен ли витамин В₁ для реакций трансаминирования?

9.При дезаминировании аминокислот в организме образуются биогенные амины.

10. Выведение мочевины с мочой в количестве 20 - 35 мг/сутки является нормой.

11. Образование карбамоилфосфата в синтезе мочевины требует затраты двух молекул АТФ.

12. Аргиназа катализирует образование оксида азота.

13. Аминогруппа аспартата служит одним из источников азота в молекуле мочевины.

14. Являются ли аминокислоты единственным источником аммиака в организме?

15. Расходуется ли АТФ в глутаминсинтетазной реакции?

16. Выводится ли ион аммония с мочой?

17. Декарбоксилирование аминокислот является необратимым процессом.

18. Аммиак образуется при любом типе дезаминирования аминокислот.

19. Обладает ли гистамин сосудосуживающим действием?

20. Все ли природные аминокислоты могут "сгорать" в ЦТК?

21. Может ли из аланина образоваться глюкоза в организме человека?

22. Относится ли лейцин к кетогенным аминокислотам?

Дата добавления: 2014-12-27