Определение общего белка рефрактометрическим методом

Работа №1.

Принцип метода. В основе рефрактометрии лежит неодинаковая способность различных сред преломлять проходящие через них лучи света. Отношение синуса угла падения к синусу угла преломления называется показателем (коэффициентом) преломления:

Степень рефракции раствора обусловлена количеством, размерами и физическим состоянием растворённых в нём частиц, а также температурой окружающей среды. В сыворотке крови величина рефракции зависит в первую очередь от количества и качества белков; солям и другим составным частям принадлежит меньшая роль. Для определения показателя преломления служат особые приборы – рефрактометры. Схема устройства рефрактометра на рис. 1.

Рис. 1. Схема устройства рефрактометра.

1 – зеркало; 2 и 4 – призмы; 3 – сыворотка; 5 – окуляр; 6 – белое и тёмное поле в окуляре; 7 – шкала для отсчёта поворота угла призм, показатель преломления (рефракция).

Оборудование и исследуемый материал:

1. Рефрактометр 2. Фильтровальная бумага 3. Сыворотка и вода

Расчёт. Определив показатель преломления по таблице, вычисляют процент содержания белка в испытуемой пробе (г/100 мл). Коэффициент пересчета в единицы СИ (г/л) равен 10.

Примечания. Чувствительность метода невелика (0,5-1%).

Таблица. Вычисление процентного содержания белка по показателю преломления

Показатель преломления	Белок в сыворотке крови, г/100	Показатель преломления	Белок в сыворотке крови, г/100
1,33705 1,33743 1,33781 1,33820 1,33858 1,33896 1,33934 1,33972 1,34000 1,34048 1,34086 1,34124 1,34162 1,34199 1,34237 1,34275 1,34313 1,34350 1,34388 1,34426 1,34463 1,34500 1,34537	0,63 0,86 1,08 1,30 1,52 1,74 1,96 2,18 2,40 2,62 2,84 3,06 3,28 3,50 3,72 3,94 4,16 4,38 4,60 4,81 5,03 5,25 5,47	1,34575 1,34612 1,34650 1,34687 1,34724 1,34761 1,34798 1,34836 1,34873 1,34910 1,34947 1,34984 1,35021 1,35058 1,35095 1,35132 1,35169 1,35205 1,35242 1,35279 1,35316 1,35352 1,35388	3,68 5,90 6,12 6,34 6,55 6,77 6,98 7,20 7,42 7,63 7,85 8,06 8,28 8,49 8,71 8,92 9,14 9,35 9,57 9,78 9,99 10,20 10,41

Клинико-диагностическое значение: повышение содержания белка в крови (гиперпротеинемия) наблюдается при венозном стазе, гипогидратации, гипериммуноглобулинемии; снижение уровня белка в крови (гипопротеинемия) ниже 60 г/л может быть связано с потерей белка (при гастроэнтеропатиях, ожогах, нефротическом синдроме) и снижением синтеза белка (при тяжелой белковой недостаточности, хронических заболеваниях печени). Норма (сыворотка) - 65-85 г/л.

Рисунок. Электрофореграмма белков сыворотки крови и состав белковых фракций.

Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время.

Вопросы:

· Какие вещества в крови транспортируются в комплек­се с белками?

· Объясните механизм развития голодных отеков.

· Как может измениться уровень альбуминов плазмы при поражении печени? Почему?

· Почему анализируют состав венозной, а не артериальной крови?

· Каковы основные физиологические функции крови?

· Какие белки плазмы крови играют основную роль в поддержании на определенном уровне онкотического давления?

· Какие небелковые органические вещества содержатся в крови?

· В чем состоит диагностическая ценность определения общего белка, остаточного азота, ферментов (ЩФ, амилазы, АлАТ, АсАТ, ЛДГ) сыворотки крови.

Дата добавления: 2014-12-27