Лабораторная работа 5. Специфичность действия ферментов

Описание работы

Приборы и материалы

Раствор амилазы (слюна)

Раствор крахмала 1%

Раствор йода (раствор Люголя)

Раствор хлорида натрия

Раствор сульфата меди

В три пробирки отмеряют:

в 1-ую – 2,0 мл дистиллированной воды;

во 2-ую – 1,6 мл дистиллированной воды + 0,4 мл 1 % раствора хлорида натрия;

в 3-ю – 1,6 мл дистиллированной воды + 0,4 1 % раствора сульфата меди.

В каждую пробирку добавляют по 0,5 мл разведенной слюны, содержимое пробирок перемешивают и добавляют по 1,0 мл 1 % раствора крахмала. Перемешивают и оставляют стоять при комнатной температуре.

Через 5 мин в три пробирки с водой (по 1 мл в каждой), подкрашенной каплей раствора йода, отмеряют по 2-3 капли содержимого каждой опытной пробирки. Наблюдают появление окрашивания. Через 10-15 минут проводят цветную реакцию с йодом с содержимым каждой из опытных пробирок. Для этого из трех опытных пробирок отмеряют по 2-3 капли содержимого и переносят их в три пробирки с водой (по 1 мл в каждой), подкрашенной каплей раствора йода. Результаты заносят в таблицу 3.

Таблица 3- Влияние активаторов и ингибиторов на активность амилазы

Фермент	Субстрат	Время действия фермента, мин	Окраска жидкости после добавления йода в присутствии:
воды	хлорида натрия	сульфата меди
Амилаза	Крахмал
Амилаза	Крахмал
Амилаза	Крахмал

Ферменты в отличие от неорганических катализаторов обладают чрезвычайной специфичностью действия по отношению к их субстратам. Специфичность ферментов проявляется по-разному. Различают специфичность по отношению к типу химической реакции, катализируемой ферментом, и специфичность по отношению к субстрату. Эти два вида специфичности присутствуют у каждого фермента. Субстратная специфичность выражается в способности фермента катализировать превращение субстрата только определенного химического строения. Так, фермент амилаза расщепляет в крахмале) α (1-4)-гликозидные связи с образованием конечного продукта - дисахарида мальтозы (1,4-глюкозидоглюкозы).

Фермент сахараза (b-фруктофуранозидаза) катализирует гидролитическое расщепление в дисахариде - сахарозе α (1-2)-гликозидной связи с образованием глюкозы и фруктозы, т.е. получается инвертный сахар:

α β

Сахараза не расщепляет другие дисахариды и полисахарид крахмал.

1 Цель работы – определить специфичность действия ферментов амилазы и сахаразы

Дата добавления: 2015-04-24