Сделать вывод

Принцип метода.

Название реакции.

3. Результаты записать в таблицу:

№ п/п	Исследуемый материал	Название реакции	Что открывают	Реактивы и условия	Наблюдаемый результат

· Биуретовая реакция на белки и пептиды. Принцип: в щелочной среде раствор белка при добавлении разбавленного раствора сульфата меди окрашивается в сине-фиолетовый цвет; окраска обусловлена образованием комплексов ионов меди с пептидными группами белка; биуретовую реакцию дают все белки, а также олигопептиды, содержащие не менее двух пептидных связей.

Ход работы. К 5 каплям 1%-го раствора яичного белка вносят 3 капли 10%-го раствора NaOH и 1 каплю 1%-го раствора CuSO₄. Наблюдают образование сине-фиолетового окрашивания.

· Нингидриновая реакция. Принцип: при нагревании нингидрин образует с NH₃ , который выделяется при гидролизе из α-аминогрупп аминокислот, соединение сине-фиолетового цвета.

Ход работы: к 5 каплям 1%-го раствора яичного белка добавляют 5 капель раствора 0,5%-го раствора нингидрина; помещают пробирку в кипящую водя-ную баню на 5 мин. Наблюдают за развитием розово-фиолетового окрашивания, переходящего со временем в сине-фиолетовое.

· Ксантопротеиновая реакция на ароматические аминокислоты (тирозин, фенилаланин, триптофан). Принцип: при нагревании с концентрированной азотной кислотой растворы белка дают желтое окрашивание; реакция обусловлена наличием в белках ароматических аминокислот и основана на образовании нитропроизводных этих аминокислот.

Ход работы. К 5 каплям 1%-го раствора яичного белка добавляют 3 капли кон-центрированной HNO₃ и нагревают (осторожно!) в горячей водяной бане; появ-ляется осадок желтого цвета, пробирку охлаждают и добавляют 10 капель 10% NaOH – появляется оранжевое окрашивание.

· Реакция Адамкевича на триптофан. Принцип: триптофан в кислой среде вступает в реакцию с глиоксиловой кислотой (альдегидами), образуя при этом окрашенные в красно-фиолетовый цвет продукты конденсации.

Ход работы. К 5 каплям 1%-го раствора яичного белка добавляют 5 капель ле-дяной уксусной кислоты, которая всегда содержит небольшое количество гли-оксиловой кислоты. Полученную смесь вначале нагревают 1-2 мин на водяной бане, затем охлаждают и по стенке пробирки осторожно, по каплям, чтобы жидкости не смешивались, добавляют 10 капель концентрированной серной кислоты. Помещают пробирку в кипящую водяную баню. Наблюдают образо-вание красно-фиолетового кольца на границе раздела двух слоев.

· Реакция Милона на тирозин. Принцип: в реакции ароматической аминокис-лоты тирозина, содержащей фенольное ядро, с реактивом Милона (смесь нитратов и нитритов ртути (I) и (II), растворенных в концентрированной азотной кислоте) образуется ртутная соль тирозина, имеющая красную окраску.

Ход работы. К 10 каплям 1%-го раствора яичного белка добавляют 1-2 капли реактива Милона, тщательно перемешивают и помещают в кипящую водяную баню на 1-2 мин. Наблюдают образование красного окрашивания.

• Реакция Фоля на цистеин. Принцип: цистеин, содержащий сульфгидрильную группу (-SH), при нагревании подвергается гидролизу с образованием сульфида свинца Nа₂S. Ацетат свинца реагирует со щелочью с образованием плюмбита натрия:
  (CH₃COO)₂Pb + 2NaOH → Pb(ONa)₂ + 2CH₃COOH
  Сульфид натрия при взаимодействии с плюмбитом дает черный (или бурый) осадок сульфида свинца: Na₂S + Pb(ONa)₂ + 2Н₂О → PbS↓ + 4NaOH.

Ход работы. К 5 каплям раствора яичного белка добавляют 5 капель 30%-ного раствора NaOH и 1 каплю 5% -ного раствора (CH₃COO)₂Pb. Помещают в кипящую водяную баню на 2-3 мин. Наблюдают появление черного или бурого осадка.

Дата добавления: 2015-05-10