Фотоколориметрическим антроновым методом

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЛЮКОЗЫ

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 9

Ц е л ь р а б о т ы - определить содержание глюкозы.

Метод основан на том, что при взаимодействии глюкозы с концентрированной H₂SO₄ образуется гидроксиметилфурфурол, который при нагревании на кипящей водяной бане легко конденсируется в кислой среде с антроном. Интенсивность сине-зеленой окраски продукта конденсации пропорциональна концентрации глюкозы, поэтому содержание глюкозы определяется фотоколориметрически при l = 670 нм.

конц.

Глюкоза H₂S C - H

H₂SO₄ O ||

O

Гидроксиметилфурфурол

HC CH + Антрон Комплекс (сине-зеленое

окрашивание)

O

Антроновый метод позволяет определить содержание глюкозы

0,5-1,0 моль/л.

Реактивы, оборудование, материалы:

Фотоэлектроколориметр; кюветы; баня водяная; глюкоза (0,1 моль/л раствор); кислота трихлоруксусная (5%-й раствор); кислота серная (конц.); реактив антроновый.

Приготовление антронового реактива.

В фарфоровый стакан вносят 34 мл воды, 66 мл концентрированной H₂SO₄.

В горячий раствор добавляют 50 мг антрона и немного мочевины. Готовят перед употреблением.

Порядок выполнения работы

Готовят опытную пробу: в пробирку наливают 0,5 мл раствора глюкозы неизвестной концентрации.

Готовят контрольную пробу: в другую пробирку помещают 0,5 мл дистиллированной воды. В обе пробирки добавляют по 1 мл концентрированной серной кислоты и по 2 мл антронового реактива. Смесь аккуратно перемешивают. Пробирки быстро опускают в кипящую водяную баню на 10 мин, предварительно закрыв пробирки фольгой, далее пробирки охлаждают.

Контрольную и опытную пробы колориметрируют в кюветах с толщиной слоя по 5 мм с красным светофильтром (длина волны 670 нм).

Содержание глюкозы (в ммоль/л) в исследуемом растворе рассчитывают по калибровочной кривой. Данные для ее построения

приведены в табл. 12.

Таблица 12

Содержание глюкозы, С, ммоль/л	Оптическая плотность, Д
	0,80
	0,70
	0,60
	0,45
	0,30
	0,20
0,5	0,15

Дата добавления: 2015-07-13