Исследуемый материал и реактивы

Ход работы

Исследуемый материал и реактивы

Ход работы

Исследуемый материал и реактивы

Водорастворимые витамины

Ход работы

В сухую пробирку вносят 5 капель 0,1% спиртового раствора α-токоферола и добавляют 10 капель концентрированной азотной кислоты. Встряхивают пробирку. Наблюдают за развитием красной окраски.

v Качественные реакции на витамины группы В. (диазореакция на витамин В₁).

Витамин В₁ (антиневритный) состоит из пиримидинового и тиазолового колец. Витамин В₁ получил название тиамина поскольку содержит серу и азот. Коферментная форма витамина – тиаминпирофосфат (ТПФ) входит в состав пируватдегидрогеназного и α-кетоглутаратдегидрогеназного комплексов, катализирующих окислительное декарбоксилирование пировиноградной и других кетокислот, а также является коферментом транскетолазы пентозо-фосфатного пути (ПФП).

Принцип метода. В щелочной среде тиамин с диазореактивом образует сложное комплексное соединение оранжевого цвета.

1. Раствор тиамина или поливитаминов. 2. Диазореактив (5 капель 1% раствора сульфониловой кислоты и 5 капель 5% раствора нитрита натрия). 3. Раствор бикарбоната натрия (10%).

К диазореактиву, состоящему из 5 капель 1% раствора сульфаниловой кислоты и 5 капель 5% раствора нитрата натрия, добавляют 1–2 капли 5% раствора тиамина (или поливитаминов) и затем по стенке, наклонив пробирку, осторожно добавляют 5–7 капель 10% раствора бикарбоната натрия. На границе двух жидкостей появляется кольцо оранжевого цвета.

v Качественная реакция на витамин В₂.

Витамин В₂ (антисеборейный) – рибофлавин – состоит из изоаллоксазинового ядра и спирта рибитола. Коферментной формой витамина являются: флавинмононуклеотид (ФМН) и флавинадениндинуклеотид (ФАД), входящие в состав флавиновых ферментов и принимающие участие в биологическом окислении. Небольшое количество витамина В₂ образуется в кишечнике человека под действием микрофлоры.

Принцип метода. Метод основан на способности рибофлавина легко восстанавливаться, при этом раствор рибофлавина, обладающий желтой окраской, приобретает сначала розовый цвет за счет образования промежуточного продукта (родофлавин), а затем обесцвечивается, так как восстановленная форма рибофлавина бесцветна.

1. Раствор рибофлавина (0,025%) или поливитаминов. 2. Соляная кислота (концентрированная). 3. Цинк металлический (зерна).

В пробирку наливают 10 капель раствора витамина В₂ (или поливитаминов), добавляют 5 капель концентрированной соляной кислоты и опускают зернышко металлического цинка. Начинается выделение пузырьков водорода, жидкость постепенно розовеет, затем обесцвечивается.

v Качественная реакция на витамин В₆.

Витамин В₆ (антидерматитный) носит название пиридоксина, этим термином обычно обозначается группа веществ, обладающих активностью витамина В₆. К ним принадлежат пиридоксол, пиридоксаль, пиридоксамин, являющиеся производными пиридина. Кофермнтная форма витамина В₆ – фосфопиридоксаль (ФП) – участвует в ферментативных реакциях белкового обмена: трансаминирования, декарбоксилирования, десульфирования аминокислот и др. небольшое количество этого витамина синтезируется в организме человека кишечной микрофлорой.

Принцип метода. Витамин В₆ при взаимодействии с раствором хлорного железа образует комплексную соль типа фенолята железа красного цвета.

1. Раствор витамина В₆ (1%) или поливитаминов. 2. Раствор хлорного железа (III) (1%).

Дата добавления: 2017-02-01