Методы холодной стерилизации

Материалы и оборудование

Лабораторно - практическое занятие № 15.

Тема: Микрофлора животного организма и кормов. Эпифитная микрофлора растений.

Цель работы: Ознакомить студентов с эпифитнымимикроорганизмами зерна.

Исследование плесневых грибов на образцах соломы.

Навеску массой 5 г помещают в колбу с 50 мл стерильной воды и 2-3 г песка. Колбу взбалтывают круговыми вращательными движениями 10 мин. Из полученной вытяжки готовят разведения (10^-2, 10^-3, 10^-4). Отдельными стерильными пипетками Мора берут по 10 мл суспензии и переносят в колбы, содержащие 90 мл стерильной водопроводной воды. Затем из каждой колбы берут по 1 мл суспензии соответствующего разведения и вносят их в стерильные чашки Петри в двух повторностях. В каждую чашку Петри выливают по одной пробирке расплавленного, но предварительно охлажденного до 50°С МПА. Чашки инкубируют при 30 °С. Через 3-5 суток инкубации подсчитывают общее число КОЕ на МПАв чашках и рассчитывают количество КОЕ на 1 г зерна.

Колонии группируют по культуральным признакам. Из каждой группы колоний готовят препараты, выявляют принадлежность к роду или виду и определяют численность бактерий каждой группы в процентах от общего количества микроорганизмов.

Для исследования плесневых грибов на образцах соломы собирают стебли, на поверхности которых пpocтым глазом можно рассмотреть мицелий грибов. Для микроскопического исследования с поверхности стеблей делают соскоб, разводят его в капле воды, помещают на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и микроскопируют, пользуясь сухим объективом. По характеру мицелия и органов плодоношения определяют род гриба.

Зерно в колбах, пробы соломы, весы, предметные стекла, колбы со стерильной водой (по 90 мл), колбы со стерильной водой (по 50 мл) и песком, стерильные пипетки на 10 и 1 мл, стерильные чашки Петри, МПАв пробирках и колбах, водяная баня, треножник, микроскопы и все необходимое для микроскопирования.

Контрольные вопросы:

1. Что такое эпифитная микрофлора зерна?

2. Основной представитель эпифитной микрофлоры зерна.

3. Роль эпифитной микрофлоры в сохранении зерна.

Механическая стерилизация (фильтрование). Этот способ применяется для стерилизации сред в тех случаях, когда их нельзя подвергать нагреванию. При механической стерилизации стерилизуемые жидкости фильтруют через специальные фильтровальные приборы, которые имеют настолько мелкие поры, что на своей поверхности задерживают взвешенные в жидкости частицы, в том числе и микробы. Для фильтрации в микробиологической практике применяют различные фильтровальные приборы (фильтры Зейтца, свечи Шамберлана, Мандлера, Беркефельда и др.).

Химическая стерилизация. Этот вид стерилизации в практике приготовления питательных сред имеет ограниченное применение. В лабораторной практике используют некоторые химические вещества, такие как толуол, хлороформ, эфир и другие, для предупреждения бактериального загрязнения питательных сред. Для освобождения от консерванта среду нагревают на водяной бане при 56 ⁰С.

Химическая стерилизация используется также для дезинфекции оборудования, помещений, использованной посуды и отработанного микробиологического материала. В качестве дезинфицирующих веществ широкое применение нашли химические соединения, содержащие активный хлор (хлорамин, хлорная известь).

Стерилизация ультрафиолетовыми лучами. Этот способ стерилизации используется для стерилизации воздуха в микробиологическом боксе и в лаборатории перед проведением микробиологических исследований. Стерилизацию ультрафиолетовыми лучами проводят с помощью бактерицидных ламп.

1.1.3 Устройство парового стерилизатора и принцип его работы

Дата добавления: 2014-01-04