Аффинная хроматография

Распределительная хроматография

Распределительная хроматография является разновидностью жидкостной (жидко-жидкофазной) хроматографии. Она основана на различии в распределении веществ между несмешивающимися жидкими фазами - подвижной и неподвижной, нанесённой на твёрдый носитель (обычно носителем являются нерастворимые в используемом растворителе органические вещества, в том числе полимерные). Подвижной фазой служат растворы разделяемых компонентов в чистых растворителях или в их смесях. Обязательным условием является взаимная нерастворимость жидкостей, являющихся неподвижной и подвижной фазами. Растворитель подбирается в соответствии со временем удерживания компонентов.

Разделение компонентов смеси происходит в соответствии с их нернстовским коэффициентом распределения К:

,

где С _неподв и С _подв – концентрации подвергающегося разделению компонента соответственно в неподвижной и в подвижной фазе.

Чем больше значение К, тем ранее задерживается компонент в колонке и тем прочнее удерживается в ней.

Разновидностью распределительной хроматографии является экстракционная жидкостная хроматография,в которой неподвижной фазой служит органический экстрагент, нанесённый на твёрдый носитель, а подвижной – водный раствор веществ, подлежащих разделению. Как правило, с помощью распределительной и экстракционной хроматографии разделяют достаточно концентрированные растворы неорганических веществ, например, солей редкоземельных элементов, соединений актиноидов, в том числе и радиоактивных элементов при переработке отработанного горючего атомных электростанций, солей щелочных металлов и др.

Этот вид хроматографии основан на образовании компонентами разделяемой смеси со специфическими лигандными группами неподвижной фазы более или менее прочных связей, чаще всего, координационных. Обычно аффинная хроматография используется в биохимии и в биотехнологии для разделения биологически активных веществ. Поэтому в качестве лигандов (или, иначе, аффинантов) используют вещества с соответствующей биологической функцией, например, антитела при разделении белков, коферменты или ингибиторы – ферментов, рецепторы – токсинов и т. п.

Дата добавления: 2013-12-12