Студопедия

КАТЕГОРИИ:


Загрузка...

Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)

Окраска по Граму




Способы окраски

 

Простой способ окраски. Использование одного вида красителя:

1. Растворы метиленового синего, время окраски 3-5 минут

2. Растворы фуксина, время окраски 1-2 минут

3. Растворы бриллиантового зеленого, время окраски 3-5 минут

Данный способ прост в работе, позволяет изучить форму клетки микроорганизмов, взаиморасположение.

 

Сложные способы окраски позволяют выявить определенные структуры микроорганизмов (капсулы, споры, жгутики, нуклеотид), провести дифференциацию видов микроорганизмов (Грам плюс и Грам минус кислотоустойчивые и некислотоустойчивые). При окраске сложным способом используют 2-3 красителя, протраву, дифференцирующее вещество.

 

 

Дифференциация микроорганизмов на Грам положительные и Грам отрицательные основано на различии строения клеточной стенки. У Грам положительных микроорганизмов в клеточную стенку входит многослойный пептидогликан, с которым связаны тейхоевые кислоты. Этот комплекс образует прочное соединение с генцианвиолетом, не разрушающееся при воздействии спирта 96º.

У Грам отрицательных микроорганизмов пептидогликан однослойный, тейхоевых кислот мало, больше фосфолипидов и липопротеидов, что создает непрочное соединение с генцианвиолетом, окрашиваясь дополнительным красителем — фуксином. Используемые красители: карболово-спиртовой генцианвиолет, фуксин Пфейффера. Протравка — раствор Люгеля. Дифференцирующее вещество — 96º этиловый спирт.

Грам положительные микроорганизмы окрашиваются в фиолетовый цвет — стафилококки, стрептококки, пневмококки.

Грам отрицательные окрашиваются в малиновый цвет — менингококки, гонококки.

 

Этапы окраски

1. На препарат кладут фиолетовую бумажку по Синёву и сверху наносят несколько капель физраствора. Окрашивают 1-2 мин.

2. Снять пинцетом бумажку с препарата, слить в лоток избыток краски

3. Не промывая препарат водой, нанести несколько капель раствора Люголя и держать до почернения препарата примерно 1 минуту.

4. Не промывая препарат водой, нанести сверху раствор 96º этилового спирта; держать до отхождения красителя

5. Промыть физраствором или стерильной дистиллированной водой

6. Докрасить фуксином Пфейффера — 3 минуты

7. Промыть физраствором или стерильной дистиллированной водой.

 

Самостоятельная работа:

1. Приготовить 2 препарата из микробной культуры.

2. Окрасить простым способом (м/с) и сложным по Граму

3. Провести иммерсионную микроскопию, зарисовать.

 

Занятие №4 «Изучение шаровидных форм бактерий. Окраска по Бури-Гинсу и Ожешко»

 

План занятия

1. Морфологические особенности шаровидных форм бактерий.



2. Тинкториальные свойства шаровидных форм бактерий

3. Окраска по Бурри-Гинсу и Ожешко

 

Знать

1. Морфологические структуры, размеры шаровидных форм бактерий

2. Микроскопию шаровидных форм

3. Методики окраски по Бурри-Гинсу и Ожешко

 

Уметь

1. Провести микроскопию демонстрационных препаратов шаровидных форм бактерий, зарисовать

2. Приготовить препарат из капсульных бактерий, окрасить по Бурри-Гинсу

3. Провести микроскопию, зарисовать

4. Приготовить препарат из споровой кульуры, окрасить по Ожешко, провести микроскопию, зарисовать.

Шаровидные бактерии — кокки имеют средний диаметр около 1 мкм. В зависимости от их расположения в мазке, что определяется характером деления клеток, патогенные кокки подразделяются на локки (двойной), стрептококки (цепочечный) и стафилококки (виноградная гроздь). Диплококки и стрептококки делятся в одной плоскости, но остаются соединенными цитоплазматическими мостиками. К диплококкам относятся:

1. Пневмококки — диплококки ланцетовидной формы

2. Менингококки — диплококки бобовидной формы

3. Гонококки — диплококки бобовидной формы.

Стафилококки делятся в двух плоскостях и образуют скопления клеток, напоминающие грозди.

 

Непатогенные кокки располагаются беспорядочно (микрококки) тетрадами и пакетами по 8-16 особей (сарцины). Тетракокки и сарцины делятся в двух-трех плоскостях.

 

Спор и жгутиков патогенные кокки не образуют. Капсулы имеют только некоторые кокки, например пневмококки.

 

Тинкториальные свойства.

 

Гр +: стафилококки, стрептококки, пневмококки

Гр -: менингококки, гонококки

 





Дата добавления: 2013-12-13; Просмотров: 873; Нарушение авторских прав?;


Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет



ПОИСК ПО САЙТУ:


Читайте также:



studopedia.su - Студопедия (2013 - 2017) год. Не является автором материалов, а предоставляет студентам возможность бесплатного обучения и использования! Последнее добавление ip: 107.22.109.65
Генерация страницы за: 0.807 сек.