Учет бактерий в ризосфере методом Красильникова

Общие сведения

Микроорганизмы, обитающие в ризосфере и ризоплане растений

Материалы и оборудование

Гелевые пластины, пропитанные минеральной средой Виноградского (в чашках Петри), симазин или атразин, почва, микроскопы и вес необходимое дли микроскопирования.

Чем ближе к корневой системе расположена почва, тем больше бактерий в ней содержится. Особенно много микроорганизмов на поверхности корня — в ризоплане (от греч. rhiza — корень, plane — ровно). Здесь обитают преимущественно эпифиты (от греч. epi — над, на; phyton — растение). В слое почвы (2—3 мм), прилегающем к корням, получившем название ризосферы, в ка­честве дополнительного источника питания бактерии использу­ют продукты распада отмерших тканей корня. Питательными веществами для бактерий, обитающих на корнях, служат про­дукты экзосмоса растений (корневые выделения).

В ризосфере могут развиваться те же формы бактерий, что и в почве, отдаленной от корней, но на корнях обычно преобладают неспороносные палочки рода Pseudomonas, при­чем на корнях злаков, бобовых и других растений поселяются неодинаковые их виды и разновидности. Это объясняется раз­личием в обмене веществ у отдельных видов растений.

В прикорневой зоне растений бактерии в известной мере играют роль санитаров, очищая се от продуктов метаболизма растений. Минерализуя органические остатки, они в то же время переводят ряд элементов питания в доступную для рас­тений форму. Отдельные виды бактерий, развивающиеся на корнях, продуцируя ростовые вещества и витамины, оказыва­ют положительное влияние на рост растений. Однако многие бактерии корневой зоны обладают денитрифицирующей спо­собностью и в условиях недостаточной аэрации могут обусловить значительные потери азота из почвы.

Стерильной лопатой подкапывают почну под растением, сте­рильным пинцетом извлекают корни. Приставшую к корням почву стряхивают в стерильную чашку Петри, перемешивают и из нее берут навеску в 1 г (одновременно берут навеску для определения влажности почвы). Навеску помещают в 100 мл стерильной водопроводной воды и готовят ряд разведений.

При поверхностном посеве из полученных разведений стерильной микропипеткой наносят на поверхность питатель­ных пластин (МПА, КАА и др.) по 0,05 мл и шпателем досуха втирают в агар. При глубинном посеве из разведений стериль­ной пипеткой берут 1 мл суспензии и вносят в стерильную чашку Петри, а затем добавляют соответствующую агаризованную питательную среду.

Выросшие на агаре колонии подсчитывают визуально и под лупой (см. 5.1.1).

Для определения качественного состава бактерий коло­нии на чашке группируют по культуральным признакам. Из каждой группы готовят препарат и выявляют форму бактерий. Видовую принадлежность устанавливают, делая пересев из ко­лонии на скошенный агар, и после очистки культуры изучают ее морфологические и физиологические признаки.

Дата добавления: 2014-01-04