Определение аммонифицирующей активности почвы

Аммонифицирующая активность почвы и микроорганизмов

Материалы и оборудование

Активности почвы по выделению диоксида углерода

Метод основан на том, что в почве, лишенной корней, источ­ником СО₂ являются микроорганизмы, выделяющие его при дыхании. Количество таза определяют, улавливая его Ва(ОН)₂ или в аппарате Варбурга.

В первом случае 150—200 г почвы, просеянной через си­то с ячейками 2 мм. помешают в стерильную склянку Тищенко на 500—600 мл с двумя отводными трубками. Влажность почвы стерильной водой доводят до 60% ПВ. Воздух предварительно очищают от СО₂, пропуская через две последовательно соеди­ненные склянки Тищенко, содержащие 30%-ный раствор NaOH и стерильную водопроводную воду, предназначенную для увлажнения почвы (воздух пропускают через почву по нижнему отверстию склянки).

Прошедший сквозь почву воздух выходит через выход­ную трубу в две последовательно соединенные склянки Дрекселя на 250—300 мл, содержащие по 100 мл 0,1 и. раствора Ва(ОН)₂ с фенолфталеином. Выходная трубка склянки Тищен­ко с почвой соединена резиновой трубкой с тубусом склянки Дрекселя. Через установку во время опыта воздух продувают со скоростью 1—2 л/ч при помощи аспиратора или водоструйного насоса. Продолжительность продувания 10—12 дней.

По окончании опыта или по мере нейтрализации Ва(ОН)₂ диоксидом углерода титрованием 0,1 н. щавелевой кислотой определяют не использованный в реакции Ва(ОН)₂. По его расходу устанавливают количество выделившеюся СО₂ по уравнению

Ва(ОН)₂ + СО₂ = ВаСО₃ + Н₂О

Для каждого почвенного образца параллельно определя­ют содержание диоксида углерода в двух пробах.

Количество выделяемого диоксида углерода за опреде­ленный промежуток времени пересчитывают на 1 г абсолютно сухой почвы, или на 1 г гумуса.

Стекла (5x25 см), хорошо отмытые и обшитые льняным полотном, стеклянный вагнеровский вегетационный сосуд с почвой, 0,5%-ный раствор нингидрина в ацетоне, склянки Тищенко на 500—600 мл, 30%-ный раствор NaOH, стерильная водопроводная вода, склянки Дрекселя на 250—300 мл. 0,1 н. Ва(ОН)₂. фенолфталеин, водоструйный насос, 0,1 н. щавелевая кислота.

100 г свежей почвы, просеянной через стерильное сито с ячейками 2 мм, помещают в стерильные колбы Эрленмейера на 250 мл. К почве добавляют субстрат для аммонификации (1% кровяной муки, содержащей 11,5% азота, или 1% пептона, или 1-2% гороховой муки). Влажность почвы доводят до 50— 60 % ПВ. Колбы закрывают ватными пробками и ставят в тер­мостат при 28—30 °С.

Через 7 сут компостирования почву опытных вариантов и контрольную подвергают анализу. Для этого из тщательно перемешанной почвы берут навеску в 3—5 г. помешают ее в колбу Эрленмейера на 250 мл, добавляют 100 мл 1 н. раство­ра КС1 или NaCl и фильтруют через бумажный фильтр. Про­мывку почвы 1 н. раствором KCI продолжают до полного ис­чезновения аммиака (проба с реактивом Несслера). Почвен­ную вытяжку в 1 н. растворе KCI доводят до определенного объема, затем из нее берут 50 мл. Аммиак отгоняют, используя отгонный аппарат для определения азота по микрометоду Кьельдаля. Конденсированная вода с аммиаком из холодильника поступает в колбу с титрованным 0,1 н. раствором H₂SO₄, содержащим индикатор. Остаток кислоты титруют 0,1 н. щелочью в при­сутствии метилового красного. 1 мл 0,1 н. серной кислоты, нейтрализован­ной аммиаком, соответствует 1,7 мг ам­миака, или 1,4 мг азота.

Хорошие результаты дает определение аммиака в чашках Конвея (рис. 30), которые состоят из двух цилиндров, вставлен­ных один в другой, имеющих общее дно.

	Рис. 30. Чашка Конвея

Чашки плотно закрыва­ют пришлифованной к верхнему краю внешнего цилиндра стек­лянной крышкой, которую для лучшей герметичности смазывают смесью воска и вазелина.

Во внутреннюю часть чашки вносят 1 мл титрованного раствора 0,1 н. H₂SO₄ и добавляют 1—2 капли метилового красного. Держа чашку наклонно, во внешнюю ее часть нали­вают 1—2 мл исследуемого раствора. Затем чашку ставят горизонтально и, держа левой рукой наготове крышку, вносят в противоположный конец внешней части 1 мл насыщенного раствора К₂СО₃ (можно заменить 10%-ным раствором КОН). Потом быстро закрывают чашку крышкой и вращательным движением перемешивают содержимое внешней части чашки. Контролем служит слепая проба, где исследуемый раствор заменен дистиллированной водой. Затем чашки (в нескольких повторностях) оставляют на сутки при комнатной температуре или на несколько часов ставят в термостат при 35—37° С. Пос­ле этого крышку снимают и титруют 0,02 н. или более слабым раствором щелочи до изменения окраски индикатора.

Дата добавления: 2014-01-04