Дифференциальная окраска хромосом

Этапы кариотипирования

В настоящее время наряду с рутинными методами изучения кариотипа используются методы дифференциальной окраски, позволяющие выявить в хроматидах чередование окрашенных и неокрашенных полос. Они называются бэндами и имеют специфическое и точное распределение, обусловленное особенностями внутренней организации хромосомы

Методы дифференциальной окраски были разработаны в начале 70-х годов ХХ-го века и стали важной вехой в развитии цитогенетики человека. Они имеют широкое практическое применение, т.к.:

- чередование полос не носит случайный характер, а отражает внутреннюю структуру хромосом, например распределение эухроматиновых и гетерохроматиновых участков, богатых AT или GC последовательностями ДНК, участков хроматина с разной концентрацией гистонов и негистонов;

- распределение бэндов идентично для всех клеток одного организма и всех организмов данного вида, что используется для точной идентификации вида;

- метод позволяет точно идентифицировать гомологичные хромосомы, которые являются одинаковыми с генетической точки зрения и имеют сходное распределение бэндов;

- метод обеспечивает точную идентификацию каждой хромосомы, т.к. разные хромосомы имеют разное распределение бэндов;

- дифференциальная окраска позволяет выявить многие структурные нарушения хромосом (делеции, инверсии), которые с трудом обнаруживаются методами простой окраски.

В зависимости от способа предобработки хромосом и техники окрашивания различают несколько методов дифференциальной окраски (G,Q,R,T,C). Используя их, можно получить чередование окрашенных и неокрашенных полос - бэндов, стабильных и специфичных для каждой хромосомы.

Характеристика различных методов дифференциальной окраски хромосом

Название метода	Используемый краситель	Природа бэндов	Практическая роль
Метод G	Giemsa	Окрашенные - гетерохроматин; неокрашенные - эухроматин	Выявление численных и структурных аномалий хромосом
Метод Q	Куинакрин (флюоресцентный краситель)	Окрашенные - гетерохроматин; неокрашенные - эухроматин	Выявление численных и структурных аномалий хромосом
Метод R (реверс)	Giemsa или флюоресцентный краситель	Окрашенные - эухроматин; неокрашенные - гетерохроматин	Выявление численных и структурных аномалий хромосом
Метод C	Giemsa или флюоресцентный краситель	Окрашенные центромерный гетерохроматин	Анализ полиморфизма хромосом
Метод Т	Giemsa или флюоресцентный краситель	окрашенные - теломерный гетерохроматин	Анализ полиморфизма хромосом

Дата добавления: 2014-01-05