Ензиматичний синтез оптично активних амінокислот з попередників

Ферментативне розщеплення сумішей D- та L-амінокислот на окремі оптично окремі ізомери після хімічного синтезу.

Застосування методів ГІ в промисловості.

1.Ацетонобутилове бродіння-в результаті маємо ряд органічних сполук-бутанол та ацетон.Основні продуценти-Clostridium Acetobutiricum.Це-паличкоподібні грампозитивні, рухливі бактерії, хемоорганотрофи.Генетичні дослідження спрямовані на:

· Отримання штамів з підвищеним виходом продуктів

· Отримання колекцій генетично-маркованих штамів.Отримання високопродуктивних штамів.

Перший метод-мутагенез.Використовують етилметансульфонат.В результаті мутанти мають порушене спороутворення, більшу частину життєвого циклу знаходяться на стадії передспори.

Окрім мутагенезу проводиться клонування та вивчення експресії генів в Е.Со1і та ін. м/о.Наприклад, була створена рекомбінантна плазміда, з вбудованими генами ендоглюконази та целобіази з Клострідії.Наступний етап цих досліджень-вбудовування цих генів, що відповідають за синтез ацетону та бутанолу.Другий напрям-вбудовування в Клострідії генів, що дозволяють зброджувати більшу к-сть субстратів.Наприклад, введення гену альфа-амілази в Клострідії з Бац.Субтіліс.

Основна проблема-токсичність бутанолу.В концентрації 7-13г/л інгібується ріст бактерій.15 ібільше- тотальна руйнація клітин.

2.Отримання продуцентів органічних кислот.

Продуцентами є як гриби, так і велика кількісчть бактерій.Наприклад, виробництво лимонної кислоти.Для одержання продуценту використовують в основному методи традиційної селекції(Природний, штучний добір, гібридизація).Використовують мутагенез і хімічний і фізичний.

Ітахонова кислота-продуцент-Asp.Tereus.Мутагенез УФ та гамма-променями підвищує продуктивність продуценту на 20%.

3.Амінокислоти продукують у промислових масштабах Corynebacterium,Brevibacterium,Artrobacter,Bacillus,Microbacterium. Надлишкова кількість ам-к-т продукується при наявності генетичного блоку.Бревібактеріум Флавум-20-30 г/л глутамінової кислоти.Основний напрям генетичної інженерії-отримання ауксотрофів.Крім того, створюються регулят.мутанти, що не мають генет.блоку

ЛК_6 (8.10)

До біотехнологічних методів належать:

Пр1: Суміш D- та L-амінокапролактану під дією гідролази перетворюють на L-лізин.

Пр2: Ефіри D- та L-амінокислот під дією естерази перетворюють на L-амінокислоти

Пр1: Фумарат амонію під дією аспартази перетворюють на L-аспарагінову кислоту.

Пр2: Корична кислота під дією фенілаланінаміакліази перетворюється на L-фенілаланін. Попередниками можуть бути: фенол, пірувати, кето-, оксикислоти.

Пр3: Біотрансформація.

Дата добавления: 2014-01-07