Студопедия

КАТЕГОРИИ:


Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)

Деление клеток

ЯДРО

 

Ядро является обязательной, важнейшей ча­стью клеит, содержащей её генетический аппа­рат Оно выполняет следующие функции: 1) хранение генетической информации (в молеку­лах ДНК, находящихся в хромосомах); 2) реали­зацию генетической информации (контроль и ре­гуляция разнообразных процессов в клетке); 3) воспроизведение и передача генетической ин­формации дочерним клеткам (при делении).

 

Обычно в клетке имеется только одно ядро, но встречаются и многоядерные клетки (образу­ются вследствие митоза, не сопровождающегося цитотомией).

Форма ядра зависит от формы клетки. Так, клетки круглой и кубической формы обычно имеют круглое ядро, клетки плоские - уплощён­ное, клетки призматической формы - овальное ядро, клетки веретеновидной формы - палочко­видное ядро. Встречаются и сегментированные ядра (в лейкоцитах).

 

Размеры ядра и ядерно-цитоплазматическое отношение обычно постоянны для каждого типа клеток, увеличиваясь при усилении её функцио­нальной активности.

Основные компоненты ядра: ядерная оболоч­ка, хромосомы (хроматин), ядрышко, карио­плазма, кариоскелет.

 

Ядерная оболочка отделяет ядро от цито­плазмы, отграничивает его содержимое и обес­печивает обмен веществ между ядром и цито­плазмой. Ядерная оболочка состоит из двух биологических мембран, между которыми рас­положено перинуклеарное пространство шириной 15-40 нм. Наружная мембрана ядра по­крыта рибосомами и переходит в мембраны гра­нулярной эндоплазматической сети. К внутрен­ней мембране прилежит слой белковых фила­ментов (ламина) кариоскелета, через который к ядерной оболочке прикрепляются хромосомы.

 

В ядерной оболочке имеются отверстия - ядерные поры диаметром 90 нм. Они содержат комплекс пор, которые состо,рдо.1 центральной и 8 юр периферических белковых глобул, свя­занных между собой белковыми нитями, обра­зующими диафрагму толщиной 5 нм. Эти ком­плексы пор обладают избирательной про­ницаемостью: через них не могут пройти мелкие ионы, но переносятся длинные нити информа­ционной РНК и субъединицы рибосом. В ядре имеется несколько тысяч пор, занимающих от 3 до 35% его поверхности. Количество их значи­тельно больше в клетках с интенсивными син­тетическими и обменными процессами. В ядер­ных оболочках зрелых сперматозоидов, где био­синтез белка не происходит, поры не обнаруже­ны. Замечено также, что чем выше функцио­нальная активность клетки, тем сильнее извита кариолемма (для увеличения площади обмена веществ между ядром и цитоплазмой).

 

Хромосомы - комплексы ДНК с белком. В период митоза хромосомы конденсированы и хорошо видны в клетке под обычным световым микроскопом в виде интенсивно окрашенных па­лочковидных телец. В них очень плотно упако­ваны длинные нити Д1IK с белком. В интерфаз­ном ядре хромосомы под световым микроскопом не видны, а под электронным микроскопом в яд­ре выявляются многочисленные нити толщиной 30 нм, которые представляют собой фрагменты деспирализованных хромосом.

 

Упаковка ДНК в хромосоме. Двойная спи­раль ДНК (2 нм толщиной) наматывается на глобулы белка-гистона (по два витка на каждой глобуле), образуя нуклеосомы и нуклеосомную нить, имеющую вид «нитки бус» толщиной 11 нм. На втором уровне упаковки эта нить про­дольно скручивается (суперспирализация) с об­разованием хромосомной фибриллы толщи­ной 30 нм, которая складывается, сшивается не-гистоновыми белками, образуя петли и фибрил­лу толщиной 300 нщ (хромонема - третий уро­вень упаковки). Последняя опять образует складки и ещё более толстую и короткую струк­туру толщиной 700 нм - хроматиду, из пары которых и образуются хромосомы (толщиной 1400 нм) в делящейся клетке.

 

Подсчитано, что в каждой хромосоме (3-5 мкм длины) упакована нить ДНК длиной несколько сантиметров, а общая длина нитей ДНК в. одной клетке человека более 170 см. Эта плотность упаковки сравнима с укладкой нити длиной 20 км в клубок размером в теннисный мячик.

 

Считывание генетической информации с ДНК (транскрипция, образование информаци­онной РНК) может происходить только в деспи­рализованных (таких как нуклеосомная нить), открытых для считывания информации участках хромосом интерфазной клетки (эухроматин). В более спирализованных участках хромосом (гетерохроматин) транскрипция не происходит. Во время деления (митоза) происходит макси­мальная спирализация ДНК хромосом. В этот период генетическая информация с ДНК считываться не может и синтетические процессы в клетке резко заторможены.

Морфология митотических хромосом. Хромосомы во время митоза представляют со­бой палочковидные структуры разной длины. В них выявляется первичная перетяжка (центро­мера, кинетохор) - сложная белковая структу­ра, к которой прикрепляются микротрубочки кле­точного веретена, связанные с перемещением хромосом при делении клетки. Она делит хро­мосому на два плеча. Хромосомы с равными плечами называются метацентрическими, с плечами неодинаковой длины - субметацентрическими. Хромосомы с очень коротким вторым плечом называются акроцентрическими. Некоторые хромосомы, кроме того, имеют вбли­зи одного из концов вторичные перетяжки, от­деляющие маленький участок хромосомы - спутник. Вторичные перетяжки называют также ядрышковыми организаторами, так как в этих участках некоторых (пяти пар) хромосом содержатся гены, кодирующие рибосомную РНК и образование в интерфазе ядрышек.

 

Кариотип - совокупность хромосом данного вида животных (их число, размеры и особенно­сти строения). Например, кариотип человека со­ставляет, 22 пары, соматических хромосом +1 пара половых хромосом.

 

Хроматин - мелкие глыбки интенсивно ок­рашенного базофильного материала в фиксированном интерфазном ядре клетки. Это выпав­шие в осадок при фиксации хромосомы. Чем сильнее спирализованы, конденсированы хро­мосомы, тем крупнее эти глыбки. В виде самой крупной глыбки хроматина выявляется вторая (плотно скрученная, не функционирующая) X-хромосома в клетках женского организма. Её на­зывают половым хроматином (тельце Барра). По его присутствию в образцах тканей можно идентифицировать пол человека.

 

Ядрышки - плотные, интенсивно окрашен­ные округлые образования в ядре размером 1-2 мкм. Их может быть несколько. Ядрышки обра­зуются в ядре в области ядрышковых организа­торов некоторых хромосом. Там находятся гены, кодирующие рибосомную РНК. Ядрышки состоят из гранулярного, фибриллярного компонентов. Нити ядрышек представляют собой молекулы образовавшейся рибосомной РНК, а гранулы -субъединицы рибосом, которые образуются при связывании нитей РНК с белками, посту­пающими из цитоплазмы. Эти субъединицы че­рез ядерные поры выходят в цитоплазму, где объединяются в рибосомы и связываются с ин­формационной РНК для синтеза белка. Чем вы­ше функциональная синтетическая активность клетки, тем многочисленней и крупнее её яд­рышки.

 

Кариоплазма (ядерный сок) - жидкий компо­нент ядра, истинный раствор биополимеров, в котором во взвешенном состоянии расположены хромосомы и ядрышко. По своим физико-химическим свойствам кариоплазма близка к гиалоплазме.

 

Кариоскелет - фибриллярная сеть ядра, ко­торая уплотняется около ядерной оболочки с образованием лямины. Кариоскелет поддержи­вает определённую форму ядра и расположение в нём хромосом.

 

Основные проявления жизнедеятельности клеток - определённая структурная организа­ция, постоянный обмен веществ и энергии с ок­ружающей средой, раздражимость и возбудимость, движение, способность к самовоспроизведению.

 

Для нормальной жизнедеятельности клетки необходима определённая структурная организация, т. е. закономерное распределение в пространстве и во времени всех макромолекул, биополимеров, хромосом, мембран, органоидов и включений клетки. Это необходимое условие для нормального её существования и функционирования.

 

Обмен веществ в клетке необходим как для восстановления изношенных повреждённых структур клетки, так и для образования веществ, которые производятся и выделяются клеткой на экспорт, для нужд организма. Этот процесс на­зывается секрецией.

 

Взаимодействие структурных компонен­тов клетки при синтезе белков и небелковых веществ.

 

Все описанные выше структурные компонен­ты клетки взаимосвязаны и взаимодействуют между собой в процессе жизнедеятельности клетки. Например, при биосинтезе белка на экс­порт (секреторные белки) через цитолемму внутрь клетки поступают необходимые исходные вещества (аминокислоты). В ядре в результате транскрипции образуется информационная РНК, которая поступает в цитоплазму и несёт инфор­мацию о строении будущего белка, сюда же из ядрышек доставляются субъединицы рибосом и транспортные РНК. На рибосомах гранулярной цитоплазматической сети происходит биосинтез белка и образующиеся его молекулы поступают внутрь цистерн и каналов этой сети, где образу­ется их вторичная и третичная структура. Затем белки транспортируются в комплекс Гольджи. Там происходит дозревание (связывание белков с углеводами и липидами), накопление и упаков­ка секрета в мембраны, образование крупных вакуолей и гранул секрета. Затем секреторные вакуоли и гранулы выделяются через цитолемму апикальной части клетки путём экзоцитоза. Энергию, необходимую для синтетических про­цессов, поставляют митохондрии. Микротрубоч­ки и микрофиламенты цитоскелета обеспечива­ют перемещение в цитоплазме органелл и транспорт веществ. Изнашиваемые в ходе этих процессов органоиды разрушаются лизосомами, а вместо них образуются новые. Таким образом, большинство структурных компонентов клетки принимают участие и взаимодействуют между собой в процессе биосинтеза белка. При этом клетка функционирует как единое целое.

 

В синтезе небелковых веществ (углеводы, липиды) также участвуют ДНК ядра, информа­ционная РНК, свободные рибосомы, на которых образуются ферменты биосинтеза небелковых веществ. Эти ферменты поступают в гладкую эндоплазматическую сеть, где участвуют в синтезе углеводов и липидов. Эти вещества затем направляются в комплекс Гольджи, где упаковы­ваются в секреторные гранулы, а затем выво­дятся наружу путём экзоцитоза.

 

Секреция - это образование и выделение из клетки веществ, необходимых для других клеток, органов и всего организма, все клетки могут продуцировать определенные вещества на экс­порт, однако есть клетки, которые специализи­руются на этом - секреторные клетки. Приме­ром секреции является образование желези­стыми клетками желудка желудочного сока, слюнными и лотовыми железами - слюны и по­та. Если клетки выделяют во внешнюю среду вещества ненужные, вредные для организма, то этот процесс называется экскрецией. Если сек­рет выделяется клеткой во внутреннюю среду организма (кровь, лимфу, спинномозговую, меж­клеточную жидкость), то его называют инкретом (например, гормоны).

 

Жизненный цикл клетки.

 

Жизненный (клеточный) цикл - это весь пери­од существования клетки (от деления до смерти или следующего деления). Клеточный цикл со­стоит из митотического периода (М) и интер­фазы (межмитотического периода). Интерфаза в свою очередь состоит из пресинтетического (G1), синтетического (S) и постсинтетического (G2) периодов. В пресинтетическом (постмитотическом, G1) периоде дочерняя клет­ка достигает размеров и структуры материнской, для чего в ней происходит биосинтез РНК и бел­ков цитоплазмы и ядра. Кроме того, в ней синте­зируются РНК и белки, Необходимые для синте­за ДНК в следующем периоде. В Синтетиче­ском (S) периоде происходит удвоение (редуп­ликация) ДНК и, соответственно, удваивается число хромосом (их количество становится тетраплоидным, 4n). В постсинтетическом (премитотическом, G2)периоде клетка готовится к митозу, в ней происходит синтез РНК и белков (тубулинов) веретена деления, накопление энергии, необходимой для митоза. Вышеопи­санный жизненный цикл характерен для популя­ции клеток, которые непрерывно делятся.

 

Кроме того, в организме есть клетки, которые временно или постоянно находятся вне митоти­ческого цикла (в G0 периоде). Этот период ха­рактеризуется как состояние репродуктивного покоя. Такие клетки можно разделить на три группу:

 

1) клетки, которые после деления дли­тельно не меняют своих морфологических свойств и сохраняют способность к делению; это стволовые, камбиальные клетки (в эпителии, красном костном мозге);

2) клетки, которые по­сле деления растут, дифференцируются, вы­полняют в органам специфические функции, но в случае необходимости (при повреждении данно­го органа) восстанавливают свою способность к размножению (клетки-печени).

3) высокоспециализированные клетки, которые растут, дифференцируются, выполняют свои специфические функции и в таком состоянии существуют до смерти, никогда не делясь и постоянно находясь в G0 периоде (высокоспециализированные клетки сердца и мозга). Продолжительность жизни этих клеток приближается к продолжительности жизни целого организма.

 

После появления в результате деления мо­лодые клетки растут и дифференцируются. Рост клетки означает увеличение размеров её цитоплазмы и ядра, увеличение числа органелл. Дифференцировка подразумевает морфофункциональную специализацию клетки, т. е. увеличение числа определённых органелл об­щего назначения, или появление органоидов специального назначения, необходимых для вы­полнения клеткой специальных функций. От не­скольких дней до многих лет клетка выполняет свою определённую функцию в организме, а за­тем постепенно стареет и погибает.

 

Старение клеток связано с изнашиванием структур клеток в результате длительной, интен­сивной работы, прежде всего, в связи с измене­ниями состояния генома и, как следствие, в свя­зи со снижением интенсивности репликации ДНК, приводящем к угнетению биосинтеза бел­ка. При этом популяция клеток может постепен­но уменьшаться (нервные клетки, кардиомиоциты), или частично (клетки печени, почек, желез) или полностью (покровные эпителии) обнов­ляться. При этом процесс обновления может ид­ти очень быстро: полное обновление эпидерми­са кожи происходит за 3-4 недели, а эпителия желудка и кишечника - за 3-5 дней. Дли­тельность существования этих обновляющихся популяций равна продолжительности жизни ор­ганизма.

 

При старении увеличивается объём клетки, нарушаются межклеточные контакты, уменьша­ется текучесть её мембран и интенсивность транспортных и обменных процессов. В ре­зультате повреждения рецепторов цитолеммы уменьшается возбудимость и реактивность клет­ки, дезорганизуется цитоскелет. Ядро клетки становится неровным, расширяется перинуклеарное пространство, увеличивается доля гетерохроматина. Митохондрии просветляются, в них уменьшается количество крист, наблюдает­ся расширение цистерн эндоплазматической се­ти, уменьшение числа рибосом, происходит ре­дукция комплекса Гольджи. Увеличивается чис­ло всех видов лизосом, включая остаточные тельца, в которых накапливаются трудно пере­вариваемые вещества (например, пигмент ста­рения липофусцин), уменьшается стабильность лизосомальных мембран, возрастает аутофагия. В результате клетка постепенно разрушается и ее остатки фагоцитируется макрофагами.

 

Смерть клетки. Различают две фермы гибели клеток - нек­роз и апоптоз.

Некроз вызывается главным образом раз­личными внешними факторами (химическими или физическими), которые нарушают прони­цаемость мембран и клеточную энергетику. В результате нарушается ионный состав клетки, происходит набухание мембранных органоидов, прекращается синтез АТФ, нуклеиновых кислот, белков, происходит деградация ДНК, активация лизосомных ферментов, что в итоге приводит к растворению, "самоперевариванию" клетки — ли­зису. Этот процесс преобладает при старении клетки.

 

А по птоз начинается с активации в ядре ге­нов, ответственных за самоуничтожение клетки (генетической программы смерти). Программа такого самоуничтожения может включаться при воздействии на клетку сигнальных молекул или наоборот, прекращении действия регулирую­щего сигнала. Апоптоз широко распространён в эмбриогенезе, в процессе которого в организме образуется гораздо больше клеток,, чем. нужно для взрослого организма, Примером запро­граммированной гибели клеток во взрослом ор­ганизме является атрофия молочной железы после окончания лактации, гибель клеток жёлтого тела в конце менструального цикла или бере­менности. Процесс апоптоза, значительно отли­чается от некроза. В начале апоптоза синтез РНК и белка не снижается, в цитоплазме клетки возрастет содержание, ионов кальция, акти­вируются эндонуклеазы, под действием которых происходит расщепление ДНК на нуклеосомные фрагменты. При этом хроматин конденсируется, образуя грубые скопления по периферии ядра. Затем. ядра начинают фрагментироваться, распадаться на «микроядра», каждое из которых покрыто ядерной оболочкой. При этом цито­плазма также начинает фрагментироваться и от клетки отшнуровываются крупные фрагменты, часто содержащие «микроядра» - апоптические тельца. При этом клетка как бы рассыпа­ется на фрагменты, а апоптические тельца по­глощаются фагоцитами или некротизируются и постепенно растворяются.

 

 

Митоз, кариокинез или непрямое деление - универсальный способ деления любых живот­ных клеток. При этом удвоившиеся и конденси­рованные хромосомы переходят в компактную форму митотических хромосом. Затем образу­ется веретено деления, которое, обеспечивает разделение и расхождение хромосом к противо­положным полюсам клетки. Митоз заканчивает­ся делением тела клетку (цитотомия). Биоло­гическая сущность митоза, заключается в равно­мерном распределении генетического материала между дочерними клетками. Процесс митоза подразделяется на несколько основных фаз - профаза, метафаза, анафаза и телофаза.

 

Профаза. ДНК в результате суперспирзлизации начинает выявляться под микроскопом в ядре клетки в виде палочковидных телец - хро­мосом. Процессы транскрипции в них прекра­щаются. Затем происходит исчезновение (де­зинтеграция) ядрышек и ядерной оболочки. Центриоли расходятся к полюсам клетки, образуется митотическое веретено (веретено деле­ния), его нити прикрепляются к кинетохорам хромосом.

 

Метафаза. В этот период заканчивается об­разование веретена деления, а хромосомы вы­страиваются в экваториальной плоскости клет­ки, образуя метафазную пластинку хромосом (вид сбоку) или материнскую звезду (вид с полюсов клетки). К концу метафазы завершает­ся процесс разделения сестринских хроматид, и они остаются связанными между собой только в области центромера. Метафаза по про­должительности занимает 30% времени всего митоза.

 

Анафаза. Хромосомы растягиваются к полюсам клетки с помощью микротрубочек веретена деления со скоростью 0,2-0,5 мкм/мин, что связано с деполимеризацией и укорочением микро­трубочек и работой белков-транслокаторов. Это самая короткая фаза митоза, занимающая по продолжительности лишь 5-10% от всего време­ни митоза.

 

Телофаза. Начинается с остановки разо­шедшихся к полюсам хромосом (ранняя телофа­за) и заканчивается созданием новых интерфазных ядер и разделением материнской клетки на две дочерние в результате цитотомии (поздняя телофаза). При этом хромосомы деконденсируются, образуются ядерные оболочки и форми­руются новые ядрышки.

 

Поскольку митоз очень сложный и тонкий про­цесс, во время деления клетки очень чувстви­тельны к воздействию физико-химических фак­торов (облучение, токсические вещества, лекар­ственные препараты). При повреждении верете­на деления может произойти или задержка ми­тоза в метафазе, или рассеивание хромосом. При нарушениях репродукции центриолей могут возникать многополюсные и асимметричные ми­тозы. Нарушения процесса цитотомии приводят к появлению гигантских ядер или многоядерных клеток.

 

Плоидность - число наборов хромосом в клетке, обозначаемое буквой n. Пропорциональное содержание ДНК в клетке обозначается бук­вой с. В половых клетках набор хромосом гаплоидный (1n и 1с), а в соматических клетках на­бор хромосом обычно диплоидный (2n и 2с). Среди соматических клеток встречаются и полиплоидные, в которых набор хромосом больше: тетраплоидный (4n) и даже октаплоидиый (8n).

 

Полиплоидия - образование клеток с повы­шенным (больше диплоидного) содержанием хромосом. Такие клетки появляются в ре­зультате отсутствия или незавершенности отдельных этапов митоза, при блокаде цитотомии. При этом после прохождения S и G2- периодов клетки вступают в митоз с тетраплоидным набо­ром хромосом, проходят все его фазы, но не де­лятся на две дочерние. Особый способ полиплоидизации - эндорепродукция. При этом в клетке происходит несколько циклов редуплика­ции ДНК (S-периодов), без последующего обра­зования митотических хромосом и митоза: Это приводит к прогрессивному увеличению количе­ства ДНК в ядре.

 

Двуядерные и многоядерные клетки образу­ются тогда, когда в результате митоза происхо­дит образование двух или более ядер, но без последующей цитотомии.

 

Мейоз - способ деления, в результате кото­рого образуются клетки с гаплоидным набором хромосом (половые клетки). Оба деления мейоза происходят как обычный митоз, однако в профазе первого деления происходит обмен ге­нами между гомологичными хромосомами (кроссинговер), между первым и вторым деле­нием нет интерфазы и поэтому не происходит редупликации ДНК. Биологическое значение мейоза заключается в том, что образовавшиеся мужские и женские половые клетки несут генети­ческую информацию от отца и матери и при слиянии этих клеток образуется зигота с дипло­идным набором хромосом, несущая равное ко­личество генетической информации от обоих родителей.

 

Внутриклеточная регенерация - восстанов­ление, замена структурных компонентов клетки. В процессе жизнедеятельности клетки происхо­дит постоянное изнашивание и обновление её структурных компонентов: в течение нескольких часов или дней постепенно, полностью обнов­ляются все молекулы биополимеров, из которых построены мембраны и немембранные компо­ненты клетки. Постепенно все структурные ком­поненты клетки замещаются на новые. Это осо­бенно важно для клеток, которые не способны размножаться и регенерировать на клеточном уровне (нервные клетки, клетки сердца), их структурные компоненты на протяжении долгой жизни клетки могут обновляться многократно. Даже в относительно стабильных молекулах ДНК происходит постоянная замена (репарация) ее повреждённых фрагментов.

 

Адаптация клеток - процесс приспособления клеток к изменяющимся условиям существова­ния. Например, мышечные клетки приспосабли­ваются к повышенной физической нагрузке, нервные клетки - к повышенной умственной нагрузке, клетки печени и почек - к воздействию токсических веществ, клетки кожи - к повышен­ному ультрафиолетовому облучению. При этом в клетках усиливаются процессы биосинтеза белка, увеличиваются размеры ядра, ядрышек, площадь поверхности ядерной оболочки, интен­сивность транспортных и всех необходимых об­менных процессов. Увеличиваются также коли­чество и размеры органелл, необходимых для усиленной работы клетки. Все это приводит к увеличению размеров самой клетки (гипертро­фия клетки). Адаптация клеток имеет важней­шее значение для сохранения их жизнедеятель­ности в изменённых условиях существования, в том числе и при различных заболеваниях орга­низма.

 

<== предыдущая лекция | следующая лекция ==>
Включения | Эмбриология человека -1. Развитие зародыша
Поделиться с друзьями:


Дата добавления: 2014-01-07; Просмотров: 757; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!


Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет



studopedia.su - Студопедия (2013 - 2024) год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! Последнее добавление




Генерация страницы за: 0.05 сек.