Патологической анатомии

МЕТОДИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ

Занятие 1.

Объекты, изучаемые в патанатомии делят на три группы:

1) трупный материал, полученный при аутопсии;

2) субстраты, получен­ные от больных при их жизни (органы, ткани и их части, клетки и их части, продукты секреции, жидкости);

3) экспе­риментальный материал.

■ Трупный материал. Основная цель аутопсии — установ­ление окончательного диагноза и причин смерти боль­ного. Оценивают также правильность или ошибочность клинического диагноза, эффективность лечения. Значе­ние секционной работы патологоанатома состоит не только в контроле за качеством лечебно-диагностиче­ской деятельности клиницистов, но и в накоплении ста­тистических и научно-практических данных о болезнях и патологических процессах.

■ Материал, взятый при жизни больного. Исследование материала, взятого у больного при жизни имеет гораздо большее диагностическое значение, как для больного, так и для лечащего врача и занимает много времени в работе патологоанатома. Чаще всего такие объ­екты исследуют гистологически или цитологически.

патологоанатома.

Гистологическое исследование. Этому исследованию под­вергают операционный и биопсийный материалы. Операционный материал исследуют с целью гистологического подтверждения (уточнение) диагноза, а биопсийный материал исследуют с целью установления диагноза.

Для обычной диагностики широко используют универсаль­ную гистологическую окраску срезов гематоксилином и эози­ном. Тинкториальные, т. е. красящие, свойства гематоксилина проявляются в слабощелочной среде, и структуры, окрашен­ные этим красителем в синий или темно-синий цвет, принято называть базофильными. К ним относятся ядра клеток, отло­жения солей кальция и колонии бактерий. Слабую базофилию могут проявлять некоторые виды слизи. Эозин, напротив, при рН менее 7,0 окрашивает так называемые оксифильные компо­ненты в розово-красный или красный цвет. К ним относятся цитоплазма клеток, волокна, эритроциты, белковые массы и большинство видов слизи. Очень часто применяют окраску пикрофуксином по ван Гизону. При этом изби­рательно, в красный цвет окрашиваются коллагеновые волок­на соединительной ткани, тогда как прочие структуры стано­вятся желтыми или зеленовато-желтыми.

Цитологическое исследование проводят на мазках, сделан­ных из содержимого полых или трубчатых органов, а также на препаратах-отпечатках, пунктатах и аспиратах (аспирационные пунктаты, отсасываемые шприцем). Мазки нередко изго­тавливают из материала смывов со стенок органов, что позво­ляет захватить клетки, находящиеся в процессе естественного или патологического слущивания (десквамация), например с шейки матки. Цитологический материал фиксируют обычно на предмет­ном стекле, часто во время окраски. Наиболее популярны ок­раски азур-эозином (его тинкториальные свойства близки к гематоксилину и эозину) или бисмарк-брауном по Папани-колау.

Иммуногистохимическое исследование. При некоторых па­тологических состояниях (особенно опухолях) бывает трудно и даже невозможно с помощью гисто- или цитологических окрасок определить тип ткани либо ее происхождение (гисто­генез), что имеет важное значение для диагностики и прогнозирования. Поэтому используют различные дополнительные методические подходы. Одним из них является иммуногистохимический метод: на гисто- или цитологические препараты наносят растворы с антителами к искомым антигенам: опухолевым, вирусным, микробным, аутоантигенам и др. Антигены при обычных гистологических окрасках тканей не видны. Антитела в сыворотках несут на себе метку: либо флюорохром, т. е. краситель, светящийся в темном поле (иначе говоря, дающий флюоресценцию), либо красящий фермент. Если искомый антиген есть в исследуе­мых тканях или клетках, то возникший комплекс антиген-антитело плюс маркер точно укажут его локализацию, количе­ство, помогут изучить некоторые свойства.

Методы молекулярной биологии. Д ля прижизненной диагностики применяют мето­ды молекулярной биологии: проточную цитометрию и технику гибридизации in situ. Проточная цитометрия необходима для исследования хромосом. С помощью хромосомного анали­за выявляют отклонения в генетическом аппарате (геноме) клеток, имеющие врожденный или приобретенный характер. Этот анализ особенно важен при распознавании и изучении опухолей, различные варианты которых сопровождаются вполне специфическими маркерными перестройками или аберрациями хромосом.

Электронная микроскопия бывает трансмиссионная (в про­ходящем пучке, подобно светооптической микроскопии) и сканирующая (снимающая рельеф поверхности). Первую при­меняют чаще, особенно для изучения в ультратонких срезах ткани деталей строения клеток, выявления микробов, виру­сов, отложений иммунных и других комплексов и т. д.

■ Экспериментальный материал. Эксперимент с достаточ­ным количеством лабораторных животных позволяет моделировать и изучать болезни и патологические про­цессы на любом этапе их развития.

Дата добавления: 2014-01-20