Учет на жидких средах

При определении численности микроорганизмов на жидких средах отмечают крестом пробирки с разведением, в которых развились представители исследуемой группы. Затем для более точного подсчета используют таблицу Мак-Креди, составлен­ную на основании обработки многочисленных результатов ме­тодом вариационной статистики. В соответствии с требования­ми, предъявляемыми к расчетам, необходимо составить число­вую характеристику из трех цифр (табл. 2).

Первая цифра соответствует числу параллельно засеян­ных пробирок данного разведения (отмечается последнее раз­ведение, в котором рост микроорганизмов наблюдается во всех параллельных пробирках). Следующие две цифры обо­значают число пробирок, в которых обнаружен рост микроор­ганизмов в последующих двух разведениях. В таблице Мак-Креди находят вероятное число клеток, соответствующее числовой характеристике, и эту цифру умножают на степень разведения, при которой отмечен рост во всех параллельных пробирках.

Пример расчета

Разведение	10^-2	10^-3	10^-4	10^-5	10^-6
Число параллельно засеянных про­бирок
Число пробирок, в которых обнару­жен рост

Числовая характеристика— 421; вероятное число клеток - 9,5 (найдено в таблице). Для учета клеток в 1 г абсолютно сухой почвы полученное число клеток умножают на 1000 (поскольку первая цифра числовой характеристики определяет соответствующее разве­дение: 10^-3 или 0,001) и делят на количество абсолютно сухой поч­вы, содержащейся в 1 г сырой почвы (учитывая ее влажность). При влажности почвы 25% абсолютно сухой почвы в 1 г сырой почвы будет 0,75 г. Найденное число клеток в 1 г абсолютно сухой почвы составит:

	Таблица 2 - Экспресс-обработка результатов учета микроорганизмов методом предельных разведений (по Мак-Креди)

	Окончание табл. 2

Наличие нитрифицирующих бактерий пер­вой фазы определяют по образованию нитритов — реакци­ей с цинк-йод-крахмал в кислой среде. Пробы берут через 7, 14 и 21 сут инкубации.

Денитрифицирующие бактерии и анаэробные азотфиксаторы (Clostridium pasteurianum) выявляют на 5—6-е сут культивирования по присутствию газов и поплавках.

Наличие аэробных целлюлозоразрушающих микроорганизмов определяют на 8— 10-е сут инкубации в термостате по образованию колоний и разрушению целлюло­зы на границе между жидкой средой и воздухом.

Дата добавления: 2014-01-04