Микобактерии

Лекция 18

Грамположительные палочки

Туберкулез (от лат. tuberculum — бугорок) — хроническое инфекционно-аллергическое заболевание со специфическим поражением органов дыхания, костно-суставной, мочеполовой систем, кишечника, кожи, глаз и других органов.

Возбудитель туберкулеза — Mycobacterium tuberculosis — был открыт в 1882 г. Р. Кохом.

Таксономия

Царство Procaryotae, отдел Firmicutes, порядок Actinomycetales, семейство Mycobacteriaceae, род Mycobacterium.

Виды: M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum (возбудители туберкулеза); М. avium, M. utcerans, M. kansasii, M. xenopi, M. microti (возбудители микобактериозов).

Род Mycobacterium включает более 40 видов. Помимо М. tuberculosis, туберкулез могут вызывать M. bovis, М. africanum. Другие представители рода способны вызывать заболевания легких, кожи, и лимфатических узлов. Эти заболевания получили название микобактериозов.

По патогенным свойствам род Mycobacterium подразделяют на три группы:

1) патогенные;

2)условно-патогенные (потенциально-патогенные);

3) сапрофиты.

Для их ускоренной предварительной дифференциации учитывают прежде всего три признака:

а) скорость и условия роста;

б) способность к пигментообразованию;

в) способность синтезировать никотиновую кислоту (ниацин).

По скорости роста род Mycobacterium подразделяют на 3 группы.

1. Быстрорастущие - крупные видимые колонии появляются ранее седьмого дня инкубации (18 видов).

2. Медленнорастущие — крупные видимые колонии появляются после семи и более дней инкубации (20 видов).

3. Микобактерий, которые требуют специальных условий для роста или не растут на искусственных питательных средах. К этой группе относятся два вида: М. leprae и М. lepraemurium.

Дифференциация видов микобактерий среди быстро- и медленнорастущих проводится с учетом ряда их биохимических признаков и пигментообразованию.

По способности к пигментообразованию микобактерии также делят на 3 группы.

1. Фотохромогенные — образуют пигмент лимонно-желтого цвета при росте на свету.

2. Скотохромогенные — образуют пигмент оранжево-желтого цвета при инкубировании в темноте.

3. Нефотохромогенные — пигмента не образуют (независимо от наличия света).

Все возбудители туберкулеза (М. tuberculosis, M. bovis, М. africanum) и большинство возбудителей микобактериозов являются медленнорастущими и нефотохромогенными.

Отличия микобактерий от других прокариот:

• высокое (до 60%) содержание липидов в клеточной стенке;

• кислото-, спирто- и щелочеустойчивость;

• очень медленный рост.

Морфология и тинкториальные свойства

Палочки длиной 2-4 мкм, диаметром 0,3-0,5 мкм, неподвижны, спор не образуют, капсулы нет. Условно Гр(+), но по Граму не окрашиваются.

Обладают выраженным полиморфизмом. В организме больных под влиянием химиопрепаратов часто образуются L- формы.

М. tuberculosis — аэроб. Рост стимулируется добавлением в атмосферу инкубирования 5-10% СО₂. Мезофил. Оптимальная рН 6,4-7,0.

Многие биологические свойства микобактерии объясняются высоким содержанием липидов, составляющих до 60% сухого остатка клеток:

· устойчивость к кислотам, щелочам, спирту;

· трудную окрашиваемость красителями. Для их окрашивания применяют интенсивные методы — окраску по Цилю-Нильсену;

· высокую устойчивость во внешней среде;

· устойчивость к действию обычных дезинфицирующих веществ;

· высокую гидрофобность;

· вирулентность;

· способность вызывать ГЗТ.

Факторы патогенности

1. Корд-фактор (гликолипид) — фактор адгезии, разрушает мембраны митоходрий, тормозит миграцию полиморфноядерных лейкоцитов. Корд-фактор оказывает токсическое действие на ткани и защищает туберкулезные палочки от фагоцитоза. М. tuberculosis, лишенные корд-фактора, являются непатогенными или слабопатогенными для человека и морских свинок.

2. Микозиды (гликолипиды наружного слоя клеточной стенки) — обуславливают незавершенный фагоцитоз.

3. Туберкулин (туберкулопротеины) — обладают токсическим действием в инфицированном организме. Используется для выявления сенсибилизации организма — туберкулиновые пробы Манту, Пирке.

4. Жирные кислоты (туберкулостеариновая, фтионовая, миколовая) — вызывают образование специфических гранулем и оказывают токсическое действие на ткани.

Для культивирования туберкулезных бактерий предложены различные питательные среды. Наилучшей считается яичная среда Левенштейна-Йенсена.

Характер роста на средах обусловлен гидрофобностью:

· на глицериновом бульоне рост в виде морщинистой пленки желтоватого цвета, при этом бульон остается прозрачным;

· на глицериновом агаре через 7-10 дней образуется сухой чешуйчатый налет, постепенно переходящий в грубые бородавчатые образования;

· на стекле, помещенном в цитратную лизированную кровь, рост туберкулезных бактерий, содержащих поверхностный гликолипид — корд-фактор, змеевидный; размножающиеся клетки располагаются, образуя структуру, напоминающую змею, жгут, веревку или женскую косу.

Антигенная структура М. tuberculosis. В антигенном отношении этот вид однороден (сероваров не выявлено).

Эпидемиология

Источником заражения являются больной туберкулезом человек, реже — животные. От больного человека возбудитель выделяется главным образом с мокротой, мочой или испражнениями.

Механизм передачи — аэрогенный.

Пути передачи — воздушно-капельный и воздушно-пылевой.

Возбудитель проникает в организм через дыхательные пути. Однако входными воротами могут быть любые слизистые оболочки и поврежденные участки кожи. Заражение М. bovis от крупного рогатого скота происходит в основном алиментарным путем через инфицированные молоко и молочные продукты.

Особенности патогенеза

Входные ворота инфекции: дыхательные пути, любые слизистые оболочки, любой поврежденный участок кожи. Фагоцитами возбудитель доставляется в регионарные лимфатические узлы, формируется первичный туберкулезный комплекс:

· гранулема в месте внедрения возбудителя;

· воспалительный процесс в региональных лимфатических узлах;

· сенсибилизация организма.

Доброкачественное течение — гранулемы кальцифицируются и рубцуются (у человека формируется противотуберкулезный иммунитет, но в гранулеме сохраняется возбудитель).

При действии неблагоприятных факторов, снижающих антиинфекционную резистентность организма человека — гематогенная генерализация процесса с образованием множественных очагов, склонных к распаду.

Иммунитет

Организм человека обладает высокой естественной резистентностью к возбудителю туберкулеза. Поэтому в большинстве случаев первичное заражение приводит не к развитию заболевания, а к формированию очага, его отграничению и обызвествлению. Естественная резистентность во многом определяется социально-бытовыми условиями жизни.

Процессы иммунитета протекают на фоне первичной инфекции (так называемый "нестерильный иммунитет", обеспечивающий устойчивость организма к суперинфекции).

Большое значение имеет клеточный иммунный ответ, реакция ГЗТ.

Лабораторная диагностика

Для диагностики туберкулеза применяют методы:

· бактериоскопический,

· бактериологический,

· серологический,

· аллергические пробы.

Материал для исследования в зависимости от локализации процесса:

мокрота, промывные воды желудка и бронхов, спинномозговая жидкость, кровь, моча, испражнения, гной.

Бактериоскопия: единичные палочки в препарате можно обнаружить, если в 1 мл патологического материала их содержится не менее 100 000, поэтому применяют различные методы «обогащения» или накопления туберкулезных палочек.

Метод флотации: к мокроте добавляют бензол или ксилол, который при взбалтывании разбивается на мельчайшие капельки, и поднимаясь кверху, адсорбирует на своей поверхности микобактерии туберкулеза.

Бактериологический метод (основной).

Бактериологическое исследование выявить в исследуемом материале 20-100 микобактерии, а также определить их устойчивость к лекарственным препаратам, вирулентность, видовую принадлежность.

Этапы:

· гомогенизация мокроты и обработка 5% H₂SO₄;

· посев на среду Левенштейна-Йенсена (инкубация 2-4 недели при 37°С);

· индентификация (морфологические, тинкториальные, культуральные, биохимические свойства — отличие от нетуберкулезных);

· определение чувствительности к антибиотикам методом абсолютных концентраций на среде Левенштейна-Йенсена.

Аллергодиагностика

Туберкулиновая проба. Аллергическую кожную пробу (внутрикожную пробу Манту с туберкулином) применяют как диагностический метод. 5ТЕ (0,1 мл) PPD-L вводят внутрикожно в ладонную поверхность левого предплечья. Учет реакции проводят через 48-72 ч.

Туберкулин ППД (очищенный, сухой) — очищенный белок, приготовленный из фильтратов культур микобактерии человеческого и бычьего типов, выращенных на синтетической среде. Препарат представляет собой сухой порошок туберкулопротеина. Очищенный туберкулин в стандартном разведении содержит 0,1 мл 5 туберкулиновых единиц (ТЕ).

Цели постановки пробы Манту:

· распознавание туберкулеза в детском возрасте;

· отбор детей для ревакцинации (ревакцинацию проводят в возрасте 7 лет только детям, отрицательно реагирующим на внутрикожную пробу Манту);

· определение инфицированности населения туберкулезом.

Положительный результат реакции проявляется местными изменениями (участок припухлости, гиперемии, легкой болезненности).

Молекулярно-генетические методы: метод гибридизации ДНК, ПЦР.

Лечение

Консервативное лечение туберкулеза проводят с помощью противотуберкулезных химиопрепаратов. Препараты I ряда (более ранние) включают производные парааминосалициловой кислоты (ПАСК), гидразида изоникотиновой кислоты (ГИНК) — изотиазид (тубазид), фтивазид и другие и препараты группы стрептомицина. Препараты II ряда — циклосерин, канамицин, флоримицин, рифампицин и другие антибиотики.

Профилактика

Плановая вакцинация против туберкулеза проводится вакциной БЦЖ, полученной А. Кальметтом и Ш. Гереном из ослабленного многолетними пересевами штамма М. bovis. Вакцина — живая, в организме формируется активный нестерильный иммунитет. Вакцинации подлежат все новорожденные дети на 3-4-й день жизни. Вакцину в объеме 0,1 мл, вводят внутрикожно. Ревакцинацию проводят в возрасте 7 лет только детям, отрицательно реагирующим на внутрикожную пробу Манту.

Дата добавления: 2014-01-07