Указания к оформлению лабораторной работы

Ход работы

Исследуемый материал и реактивы

Открытие пероксидазы

Лабораторная работа №14

Указания к оформлению лабораторной работы

Ход работы

Исследуемый материал и реактивы

1. Кровь. 2. Спирт. 3. Вата. 4. Скарификатор. 5. Перекись водорода (3%).

Взятие крови. Кровь для клинического анализа берут обычно после укола скарификатором в мякоть пальца. Перед взятием крови мякоть пальца должна быть высушена и обезжирена. Для этого кожу протирают спиртом и вытирают насухо стерилизованной марлей или ватным тампоном (см. Приложение).

Укол не должен быть слишком поверхностным: от того, как нанесен укол, зависит интенсивность и длительность кровотечения. Первую выступившую каплю крови стирают и дают появиться второй. Выдавливать кровь их пальца не рекомендуется.

В пробирку вносят 10-15 капель 3% Н2О2 и 1 каплю крови. Отмечают бурное выделение пузырьков кислорода и пена заполняет всю пробирку.

В тетради для лабораторных работ запишите принцип метода, реакцию, катализируемую каталазой крови, ход работы, зарисуйте полученные результаты и сделайте выводы.

Контрольные вопросы

1. Какова биологическая роль фермента каталазы?

2. Что является простетической группой фермента каталазы?

3. Где в организме содержится каталаза?

Как и каталаза, пероксидаза – геминсодержащий фермент. Пероксидаза катализирует окисление некоторых веществ (фенолы, полифенолы, ароматические амины) в присутствии перекиси водорода. От субстратов под действием пероксидазы переносятся электроны на перекись водорода. Образуется окисленный субстрат и вода. В организме млекопитающих слабой пероксидазной активностью обладают гемоглобин, миоглобин и цитохромы. Пероксидаза содержится почти во всех растительных клетках.

Принцип метода. От бензидина под действием пероксидазы переносятся электроны и протоны на перекись водорода. В результате образуется окисленный бензидин и вода. Окисленный бензидин приобретает зеленую, синюю, постепенно переходящую в бурую окраску.

1. Кровь. 2. Спирт. 3. Вата. 4. Скарификатор. 5. Раствор бензидина в ледяной уксусной кислоте (1%). 6. Перекись водорода (3%). 7. Вода.

В две пробирки наливают по 5 капель 1% раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте и по 5 капель 3% раствора перекиси водорода. В первую пробирку добавляют 5 капель крови, во вторую – 5 капель воды. Наблюдают за изменением окраски.

В тетради для лабораторных работ запишите принцип метода, ход работы, зарисуйте полученные результаты (окраска проб) и сделайте выводы.

Контрольные вопросы

1. Назовите фермент, субстрат и продукт реакции проведенной Вами лабораторной работы.

2. Какое значение для организма имеет фермент пероксидаза?

3. Какие соединения в организме обладают пероксидазной активностью?

Дата добавления: 2017-02-01