Биохимическая активность

Культуральные свойства.

Морфология и тинкториальные свойства.

Прямые или слегка изогнутые палочки размером 0,3-0,8×1-6 мкм, спор не образуют, неподвижны, имеют микрокапсулу (в ее состав входит корд-фактор). Характерно взаимное расположение бактерий в мазке – под углом друг к другу в виде букв V, X, L, Y (неполное расхождение при делении). Ложные дифтерийные палочки располагаются параллельно друг другу. В толстых мазках располагаются в виде «пучка булавок» (от сюда произошло название коринебактерий: от греч. kоryne – булава). Булавидные утолщения на концах связаны с наличием зерен волютина (тельца Бабеша-Эрнста) – гранулы полиметафосфата. Могут образовывать фильтрующиеся и L-формы.

Грамположительные микроорганизмы. При окраске по методу Нейссера цитоплазма окрашивается в желтый цвет, а зерна волютина – в синий. По методу Леффлера (метиленовым синим) цитоплазма – голубая, зерна волютина – синего цвета. Также используется окраска флюорохромом – корифосфином с последующей люминисцентной микроскопией (цитоплазма дает желто-зеленое свечение, а зерна волютина – коричнево-красное).

Возбудители дифтерии – факультативные анаэробы, оптимальная температура их культивирования 37⁰С, рН 7,3-8,0, длительность (8)12-24 часа.

Требовательны к питательным средам (не способны расщеплять белки до аминокислот), для роста необходимо наличие аминокислот, минеральных веществ и металлов.

Для культивирования применяются следующие среды:

· Среда Ру (свернутая лошадиная сыворотка) и Леффлера (свернутая лошадиная сыворотка с добавлением глюкозы) – рост в виде серовато-кремовых сухих морщинистых колоний по типу «шагреневой кожи».

· Среда Бучина с хинозолом – рост в виде плоские темно-синие колонии.

Дифференциально-диагностическими являются среды с теллуритом (растут медленнее – 24-48 часов):

· Наиболее часто используют глицериновокровяную среду с теллуритом (Клауберг II).

· Сывороточно-теллуритовый агар с цистином (Тиндаль) и другие.

На теллуритовых средах C. diphtheriae образует серовато-черные колонии, что обусловлено восстановлением теллурита до металлического теллура, имеющего черный цвет. Дифтероиды теллурит не восстанавливают.

Дифтерийный палочки малоактивны. Каталазоположительны. Сбраживают с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, галактозу, некоторые варианты ферментируют декстрин, крахмал и гликоген, не разлагают сахарозу, лактозу и маннит. Не гидролизируют мочевину (проба Закса отрицательная). Разлагают цистеин с образованием сероводорода (проба Пизу положитеьная – коричневый ореол вокруг посева «уколом» за счет образования сернистого свина). Индол не образуют.

На основании комплекса культуральных, биохимических и патогенетических свойств вид C. diphtheriae разделяется на 4 биовара: mitis, belfanti, gravis, intermedius.

Биовар mitis (легкий) характеризуется свойствами:

· Не ферментирует крахмал, гликоген и декстрин;

· Восстанавливает нитраты в нитриты;

· На средах с теллуритом образует мелкие (1-2 мм) гладкие блестящие полупрозрачные черные колонии с ровным краем;

· На жидкой среде дает равномерное помутнение и порошкообразный осадок;

· На кровяных средах дает зону гемолиза;

· Малотоксичен;

· Вызывает легкую спородическую заболеваемость.

Биовар belfanti:

Сходен с биоваром mitis, но не восстанавливает нитраты (однако этот тест необязателен для идентификации, поэтому редко выделяют данный биовар)

Биовар gravis (грубый) характеризуется следующими свойствами:

· Ферментирует крахмал, гликоген и декстрин;

· Восстанавливает нитраты в нитриты;

· На средах с теллуритом формирует крупные (2-3 мм) сухие матовые плоские серо-черные колонии, приподнятые в центре, с радиальной исчерченностью и неровным краем (напоминают маргаритку);

· На жидкой среде образуется пленка и крупнозернистый осадок (надосадочная жидкость прозрачная);

· На кровяных средах не дает гемолиз;

· Обладает выраженными токсигенными свойствами;

· Выделяется от больных с тяжелой формой дифтерии, вызывает групповые вспышки.

Биовар intermedius трудноотличим от gravis, т.к. по биохимическим и культуральным свойствам сходен с биоваром gravis:

· Не ферментирует крахмал (поэтому некоторые считают больше похожим на биовар mitis);

· Расщепляет гликоген и декстрин;

· На средах с теллуритом образует мелкие (< 1 мм) сухие матовые серо-черные колонии с неровным краем;

· На жидкой среде дает помутнение с последующим образованием мелкозернистого осадка;

· Гемолиз на кровяных средах отсутствует.

Дата добавления: 2014-01-04