Измерение скорости проведения возбуждения по нерву

ТЕСТИРОВАНИЕ ЭФФЕКТОВ ЛИДОКАНА

ТЕСТИРОВАНИЕ ЭФФЕКТОВ КУРАРЕ

Кураре является хорошо известным растительным экстрактом, который используется южноафриканскими индейцами для парализации животного, на которого они охотятся. Это альфа-токсин, который связывается с холино-рецепторами на постсинаптической мембране, что предотвращает действие ацетилхолина. Кураре блокирует синаптическую передачу, препятствуя переходу нервных импульсов от нейрона к нейрону.

1. С помощью мышки переместите капельницу от сосуда, обозначенного «Кураре» (Curare), помещая её над нервом, между стимулирующим и регистрирующим электродами. Освободите кнопку мышки, распределяя капли. Нажмите кнопку Record Date.

2. Установите стимулятор на пороговом потенциале и стимулируйте нерв.

Какой эффект на потенциал действия вы отмечаете?

Как объяснить этот эффект?

Как вы думаете, каким должен быть общий эффект кураре на организм?

3. Нажмите кнопку Clean на камере с нервом, возвращая кураре в сосуд, а нерв к его исходному состоянию.

4. Нажмите кнопку Clear, чтобы очистить экран осциллографа для следующей работы.

Работа № 7.

Лидокаин является антагонистом натриевых каналов.

1. С помощью мышки переместите капельницу от сосуда, обозначенного «Лидокаин» (Lidocaine), и поместите её над нервом, между стимулирующим и регистрирующим электродами. Освободите кнопку мышки, чтобы распределить капли.

Генерируется ли запись?

2. Стимулируйте нерв пороговым потенциалом. Нажмите кнопку Record Date.

Какой вид записи вы наблюдаете?

Почему лидокаин оказывает эффект на проведение в нервных волокнах?

3. Нажмите кнопку Clean над камерой с нервом, чтобы удалить лидокаин и вернуть нерв к исходному состоянию.

4. Зарегистрируйте результат в вашем отчете, переписав в протокольную тетрадь записи из таблицы результатов.

Таблица 2. Эффект стимуляции нерва, обработанного эфиром, кураре или лидокаином

Вольтаж	Эфир	Кураре	Лидокаин	Наличие ПД

Работа № 8.

Нажмите кнопку «Эксперимент», войдя в меню, выберите работу «Скорость нервного проведения». Появится установка для измерения скорости проведения возбуждения по нерву (рис.8)

На левой стороне экрана находятся четыре нерва, которые будут изучаться. Целый земляной червь используется потому, что он проводит возбуждение от головного (верхнего) конца к хвостовому (нижнему). Нерв лягушки чаще всего является моделью в нейрофизиологических исследованиях. Нерв крысы используется для сравнения: 1) скорости проведения разных по диаметру нервов, 2) скорости проведения миелинизированных и немиелинезированных нервов. Помните, что нерв лягушки является миелинезированным и что нерв крысы № 1 имеет тот же размер, что и нерв лягушки, но является немиелинизированным. Нерв крысы № 2 является наиболее толстым и он миелинезирован.

Ход работы:

1. На стимуляторе нажмите кнопку «Пульс» (Pulse).

2. Переключите биоусилитель, поворачивая (щелчок) горизонтальную планку на биоусилителе в положение «Включение» (On).

Рисунок № 8. Установка для измерения скорости проведения возбуждения по нерву

3. Используя мышку, переместите капельницу от сосуда, обозначенного «Этанол» (Ethanol) над нервом земляного червя и освободите кнопку мышки, распределяя капли этанола. Это будет вызывать наркотизацию червя и он перестаёт двигаться во время эксперимента, но это не влияет на скорость проведения по нерву. Алкоголь используется при достаточно низкой концентрации, чтобы червь оставался в хорошем состоянии и мог вернуться к нормальному состоянию в течение 15 минут.

4. Используя мышку, поместите земляного червя в камеру с нервом. Червь будет находиться над стимулирующими электродами и всеми тремя регистрирующими электродами.

5. С помощью кнопки (+), рядом с дисплеем Voltage установите потенциал 1,0 В. Затем нажмите «Стимулировать» (Stimulate) для стимуляции нерва.

Видите ли вы потенциал действия?

Если нет, то увеличивайте потенциал с помощью прироста его на 1,0 В пока не появится запись.

При каком пороговом потенциале вы впервые увидели генерацию потенциала действия?

6. Нажмите кнопку «Измерить» (Measure) на стимуляторе. Вы видите вертикальную желтую линию, которая появляется с левого края экрана осциллографа. Теперь нажмите кнопку (+) под кнопкой «Измерить» (Measure). Это позволяет желтой линии передвигаться на правый край. По этой линии можно измерить, сколько времени прошло на графике до точки, где линия пересекла график. Наблюдайте прошедшее время, которое фиксируется на дисплее таймера в мсек. Сохраняйте нажим на кнопку (+), пока желтая линия не достигнет правого края в точке графика, где график прекращает быть плоским (ровным) и впервые начинает возрастать.

7. Когда желтая линия позиционируется на старте подъема, отметьте прошедшее время в этой точке. Нажмите кнопку «Зарегистрировать результат» (Record Date), чтобы зарегистрировать это время на графике результатов. Программа будет автоматически выводить на компьютер скорость проведения на основе этих результатов. Заметим, что табло результатов включает в себя позицию «Дистанция» (Dist) в мм, причем это расстояние всегда составляет 43 мм. Эта дистанция включает в себя расстояние между красным стимулирующим проводом и красным регистрирующим проводом.

Важно, чтобы желтая вертикальная линия находилась в положении измеряющей линии, расположенной на старте графического подъема, до того, как вы нажмете кнопку Record Date - в ином случае скорость проведения будет рассчитываться для нерва неточно.

8. Заполните данными колонку в таблице протоколов под обозначением «Земляной червь».

9. С помощью мышки переместите земляного червя на исходное место. Нажмите кнопку Clear, чтобы освободить экран осциллографа.

10. Повторить этапы 4-9 для оставшихся нервов. Не забывайте нажимать кнопку Record Date для каждой экспериментальной серии, внося результаты в соответствующую колонку таблицы.

Ответьте на следующие вопросы:

1) Какой нерв в группе обладает самой низкой скоростью проведения? Какова эта скорость?

2) Какой нерв из четырех имеет самую высокую скорость проведения? Какова эта скорость?

3) Каковы взаимоотношения между диаметром нерва и скоростью проведения?

4) В чем заключаются физиологические причины этих взаимоотношений?

5) На основании результатов, какое можно сделать заключение относительно влияния миелшшзации на скорость проведения?

Таблица 3. Измерение скорости проведения различных нервов

Животное	Вид нерва	Порог, V	Время от стимуляции до ПД, мсек	Скорость проведения м/cек
Земляной червь	малый нерв
Лягушка	средний миелинизированный
Нерв крысы №1	средний немиелинизированный
Нерв крысы №2	большой миелинизированный

Дата добавления: 2014-11-20