Деление групп крови по системе АВО

В крови человека обнаружено более 300 антигенов. Все форменные элементы крови, белки плазмы, а также ткани имеют свою антигенную структуру, различную у каждого человека. По сочетаниям антигенов, содержащихся только в эритроцитах, можно выделить 1,5 млн. групп крови. Деление крови на группы в этой системе основано на обнаружении в эритроцитах групповых антигенов (агглютиногенов) А и В, а в сыворотке крови — соответствующих им антител (агглютининов) а и b. Присоединении соответствующих агглютиногенов (А и а или В и b) происходят агглютинация (склеивание) эритроцитов и их разрушение (гемолиз). Группа крови человека является биологической особенностью, которая не изменяется в течение всей жизни. Известно 4 группы системы АВО.

Группы крови системы АВО

Обозначение группы крови	Агглютиногены, содержащиеся в эритроцитах	Агглютинины, содержащиеся в сыворотке крови
0(I)		a и b
A(II)	A	b
B(III)	B	a
AB(IV)	A и B

Определение группы крови «простой реакцией» Для определения группы крови простым методом необходимы 8 глазных пипеток (отдельная для каждой группы серии сыворотки), мелкая тарелка, флаконы с изотоническим раствором хлорида натрия и гемагглю-тинирующие сыворотки 4 групп двух серий.

Определение крови с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток называется «простой реакцией». Определение производится на тарелке, на которой восковым карандашом наносят обозначения групп сывороток. Сначала на тарелку наносят по 1—2 капли стандартных сывороток соответственно сделанным надписям в 2 ряда для двух различных серий. В каждую каплю сыворотки добавляют испытуемую кровь, взятую из пальца или из вены, и перемешивают покачиванием. Количество крови должно быть в 10—15 раз меньше, чем сыворотки. За реакцией наблюдают не более 5 минут, после чего делают заключение о группе крови по наличию агглютинации. В те капли, где произошла агглютинация, добавляют изотонический раствор хлорида натрия после чего оценивают результат.Различают 4 классические реакции, характерные для 4 групп крови.

Агглютинация (+) при смешивании крови со стандартными сыворотками

Группа крови	Группа стандартной сыворотки
	0(1)	А (II)	В(Ш)	AB(IV)
0(1)	-	-	-	+
А (II)	+	-	+	+
В(Ш)	+	+	-	+
АВ (IV)	+	+	+	-

Агглютинация, образование «песка» в капле со смесью свидетельствуют о наличии группового антигена.

Двойная перекрестная реакция в сыворотке крови больного Простой метод определения группового антигена (группы крови) уточняется в изосерологической лаборатории с помощьюперекрестной реакции — определением групповых антител а и b в исследуемой сыворотке. Они выявляются с помощью стандартных эритроцитов А, В и О заготовленных от доноров, имеющих соответственно А (II) и В (III), О(III) группы крови.

В 3 отдельные капли сыворотки, нанесенные на тарелки, добавляют стандартные эритроциты. Через 5 минут определяют результат по наличию агглютинации

Группа крови	Группа стандартной сыворотки
	0(1)	А (II)	В(Ш)
0ав(1)	-	+	+
А в(II)	-	-	+
Ва(Ш)	-	+	-
АВо (IV)	-	-	-

Определение группы крови моноклональными антителами С помощью гибридомной биотехнологии разработаны стандартные реагенты - моноклональныме антитела: цоликлоны анти-А и анти-В, применяемые для определении я агглютиногенов эритроцитов.

Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на белый планшет по одной большой капле (0,1мл) под соответствующими надписями. Рядом с ними наносят по одной маленькой капле (0,01мл) исследуемой крови. После перемешивания составных частей за реакцие агглютинации наблюдают 2-3 мин

Группа крови	Наличие агглютинации при реакции с цоликлоном
	анти-А	анти-в
0ав(1)	-	-
А в(II)	+	-
Ва(Ш)	-	+
АВо (IV)	+	+

ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ФАКТОРА

Понятие "резус-фактор" У 85 % людей в крови имеется еще один агглютиноген — резус фактор (Rh), а у 15 % он отсутствует. На основании этого кровь всех людей делят на резус-положительную (Rh+) и резус отрицательную (Rh-). Резус-характеристика является наследственной и постоянна в течение всей жизни. При любом переливании крови необходимо точно определить резус-принадлежность реципиента и донора.

Определение резус-фактора стандартным универсальным реагентом в пробирке без подогрева В последнее время для определения резус-принадлежности применяют экспресс-метод. Реакцию проводят в пробирках без подогрева. Для этого необходима специальная, универсальная для всех групп крови системы АВО сыворотка, приготовленная особым способом на полиглюкине.

В пробирку помещают 1 каплю сыворотки, добавляют 1 каплю исследуемых эритроцитов и после 3-минутного покачивания заливают 3—5 мл изотонического раствора хлорида натрия, трижды переворачивают пробирку и определяют результат в отраженном свете. Наличие агглютинации свидетельствует о наличии Rh-антигена.

Реакция с анти-Д-моноклональными –антинтителами На планшете смешивают большую каплю анти-Д-моноклональных-антител и маленькую каплю крови.За реакцией наблюдают 3 мин. Аглютинация +резус+.

Определение резус-фактора желатиновым экспресс-методом Желатин способствует исчезновению неспецифической агглютинации. В 2 пробирки помещают 0,02-0,03 мл осадка исследуемых эритроцитов.Затем в первую добавляют 2 капли 10 % раствора желатина и 2 капли антирезусной сывортоки, во вторую(контрольную) 2 капли 10 % раствора желатина и 2 капли физ. р-ра. Модержимое осторожно перемешивают. Затем пробирки инкубируют в термостате при температуре 45-48°С в течение 30 мин,после чего добавляют 5-8 мл физ. р-ра и переворачивают 1-2 раза для перемешивания.Аглютинация +резус+. В контроле всегда -крови донора и реципиента перед переливанием крови необходимо провести пробы на индивидуальную совместимость.

Дата добавления: 2015-04-24