Обнаружение каталазы крови

Лабораторная работа №13

Указания к оформлению лабораторной работы

Ход работы

Исследуемый материал и реактивы

Открытие альдегиддегидрогеназы в молоке

Лабораторная работа №12

Изучение реакций окисления

Биологическое окисление – это окисление различных веществ в клетке в процессе её жизнедеятельности.

Основной функцией биологического окисления является обеспечение организма энергией в доступной для использования форме (прежде всего в форме АТФ) и превращение питательных веществ в компоненты клеток.

Окисление субстрата в процессе дыхания начинается с его дегидрирования – отнятия водорода. Этот процесс катализируется ферментами дегидрогеназами, которые относятся к I классу ферментов – окисдоредуктазам. По химической природе анаэробные дегидрогеназы относятся к пиридинпротеинам и флавинпротеинам. Пиридинзависимые дегидрогеназы в качестве кофактора (кофермента) содержат никотинамидаденидиникулеотид (НАД⁺) или никотинамидадениндинуклеотидфосфат (НАДФ⁺). Флавинзависимые дегидрогеназы – флавинадениндинуклеотид (ФАД) или флавинмононуклеотид (ФМН).

Фермент альдегиддегидрогеназа вырабатывается микроорганизмами, попадающими в молоко извне. По химической природе он относится к флавопротеинам, способным окислять альдегиды, в частности, формальдегид.

Принцип метода. При добавлении к некипяченому молоку формальдегида и метиленовой сини альдегиддегидрогеназа окисляет формальдегид в муравьиную кислоту, а освобождающийся при этом водород переносится на метиленовую синь, восстанавливая ее в бесцветное соединение.

1. Кипяченое молоко. 2. Некипяченое молоко. 3. Раствор формальдегида (0,4%). 4. Раствор метиленовой сини (0,01%).

В одну пробирку вносят 15 капель кипяченого молока, в другую — 15 капель некипяченого. В каждую пробирку вносят по капле 0,4% раствора формальдегида и по капле 0,01% раствора метиленовой сини. Пробирки встряхивают и закрывают пробками, чтобы создать относительно анаэробные условия. Пробирки помещают в термостат при 37⁰С и отмечают через 5 мин. Постепенное обесцвечивание метиленовой сини.

В тетради для лабораторных работ запишите, принцип метода, ход работы, зарисуйте полученные результаты (окраска проб), сделайте вывод и укажите класс исследуемого Вами фермента.

Контрольные вопросы

1. К какому классу ферментов относится альдегиддегидрогеназа?

2. Назовите кофермент альдегиддегидрогеназы. Производным какого витамина является этот кофермент?

В процессе окислительно-восстановительных процессов в организме образуется токсичная для клеток перекись водорода. Обезвреживание перекиси водорода, путем разложения её на воду и молекулярный кислород, катализируется геминсодержащим ферментом – каталазой.

Каталаза содержится во всех тканях и жидкостях организма.

Принцип метода. В результате разложения перекиси водорода под действием каталазы крови происходит бурное выделение кислорода в виде пузырьков.

Дата добавления: 2017-02-01