Качественные реакции на кровяные пигменты в моче

Ход работы

Исследуемый материал и реактивы

Определение глюкозы в моче

Ход работы

Исследуемый материал и реактивы

Ход работы

В пробирку наливают около 1 мл концентрированной азотной кислоты и осторожно из пипетки по стенке пробирки наливают мочу. В присутствии белка на границе раздела двух жидкостей образуется белый аморфный слой или муть, так называемое белковое кольцо. При отсутствии белка в моче на границе обоих жидкостей появляется цветное кольцо, обусловленное изменением пигментов мочи под действием азотной кислоты.

v Осаждение белка сульфосалициловой кислотой.

Принцип метода. Органические кислоты вызывают необратимое осаждение белков обусловленное нейтрализацией заряда белка, что приводит к разрушению пространственной структуры, денатурации и осаждению белка.

1. Патологическая моча. 2. Раствор сульфосалициловой кислоты (20% свежеприготовленный).

К 1-2 мл мочи добавляют 2-3 капли свежеприготовленного 20% раствора сульфосалициловой кислоты. При наличии белка в моче образуется белый осадок или муть.

В моче здорового человека глюкоза присутствует в виде следов (0,4 г/л) и не может быть обнаружена обычными химическими реакциями. Выделение сахара с мочой (глюкозурия) в количестве, превышающем норму, обусловлено повышением либо его содержания в крови (внепочечная глюкозурия), либо пропускной способностью почек (почечная глукозурия). Наиболее часто появление глюкозы в моче отмечается при сахарном диабете, реже при действии глюкокортикоидов (стероидный диабет). Для обнаружения сахара в моче пользуются пробами Троммера (см. л/р №4), Фелинга.

v Проба Фелинга.

Принцип метода. Реакция основана на способности глюкозы при нагревании восстанавливать Cu²⁺ в щелочной среде. При этом выпадает желтый осадок гидрата закиси меди или красный осадок закиси меди.

1. Патологическая моча. 2. Реактив Фелинга.

К 5 каплям реактива Фелинга добавляют 5 капель исследуемой мочи. Жидкость перемешивают и нагревают до начала кипения. Следует отметить, что в моче содержится много органических веществ (мочевая кислота, креатинин и др.), которые при длительном кипячении могут восстанавливать тяжелые металлы. В противоположность этому восстановление металлов в присутствии глюкозы происходит до кипения.

К числу патологических составных частей мочи относятся также кровь (точнее форменные элементы) и кровяные пигменты (гемоглобин и метгемоглобин). Появление крови в моче называется гематурия, а при наличие кровяных пигментов говорят о гемоглобинурии. Гемоглобинурия наблюдается в основном при отравлении гемолитическими ядами и при ряде заболеваний, связанных с гемолизом (распадом) эритроцитов. Гематурия имеет место при кровотечениях из почек или мочевыводящих путей. При наличии крови моча принимает красноватый оттенок, интенсивность которого зависит от количества примешанной крови. При гематурии моча бывает мутной от взвешенных форменных элементов крови, которые в моче не гемолизируются, так как она является по отношению к крови гипертоническим раствором. Окраска мочи при этом может быть разных оттенков: от ярко-красного – при переходе гемоглобина в оксигемоглобин, до вишневого – при наличии восстановленного гемоглобина. Если гемоглобин находится в виде метгемоглобина, моча принимает буроватый цвет (цвет мясных помоев). В случаях гематурии и гемоглобинурии в моче определяется белок.

v Бензидиновая проба.

Принцип метода. Проба основана на окислении бензидина атомарным кислородом, который образуется при разложении пероксида водорода кровяным пигментом – гемоглобином, оказывающим пероксидазное действие.

Дата добавления: 2017-02-01