Жидкостная хроматография

Область применения жидкостной хроматографии ВЭЖХ намного шире, чем газовой. Кроме того, этот вид хроматографии способен на анализ термостойких веществ, по­лярных и высокомолекулярных соединений. Несмотря на то, что эффек­тивность колонки ниже, чем в газовой хроматографии, ВЭЖХ применя­ется более успешно, т.к. элюент может быть модифицирован, в связи с чем возрастает разрешение колонки. Возможно модифицировать взаи­модействие между элюентом и исследуемым веществом, стационарной фазой и исследуемым веществом, элюентом и стационарной фазой. В то время как многие хроматографические методы используют в качестве элюента жидкость, ВЭЖХ отличается тем, что в этом методе находит при­менение многовалентная стационарная фаза. Совмещение ВЭЖХ с масс-спектрометрией является очень мощным аналитическим инструментом, используемым в современных лабораториях.

ВЭЖХ используется для анализа, разделения и очистки синтетических полимеров, лекарственных препаратов, детергентов, белков, гормонов и др. биологически важных соединений. Использование высокочувствительных детекторов (спктрофотометрические, спектрофлуориметрические и др.) позволяет работать с очень малыми количествами веществ (10^-11-10^-9 г), что исключительно важно в биологических исследованиях.

Свое расширенное применение ВЭЖХ нашла после раскрытия возможности повышения эффективности работы хроматографа при использовании сферических частиц диаметром от 2 до 5 μм в качестве неподвижной фазы. Однако, в связи с тем, что эти частички слишком малы в размере, необходимо прилагать усилие или давление, чтобы элюент смог просочиться через неподвижную фазу.

ВЭЖХ, как система, состоит из нескольких блоков (рисунок), на­поминающих хорошую аудио систему (даже внешний вид прибора). Некоторые из компонентов системы могут быть удалены из блока, некоторые добавлены в систему.

Компоненты жидкостного хроматографа соединены друг с дру­гом тонкой трубкой диаметром около 0,1 мм. Материал трубки, как правило, нержавеющая сталь, но встречаются и трубки из полимера РЕЕК.

Все жидкостные хроматографы включают в свою систему один или несколько насосов, которые заставляют жидкость течь внутри хроматографической колонки и создают внутреннее давление, иногда до 20000 кПА. Уровень необходимого давления зависит от скорости потока, вязкости элюента и размера частиц, составляющих основу стационарной фазы. Насосы отрегулированы таким образом, чтобы поток был непрерывным, плавным и без пульсаций, даже при варьировании составляющих элементов. Атмосферные газы, такие как азот и кисло­род, препятствуют плавному течению элюента в хроматографической колонке, т.к. образуют пузыри, мешают электрохимическим реакциям, окисляют дорогостоящие компоненты колонки, тем самым сокращая срок ее эксплуатации. Поэтому растворы, входящие в состав элюента, как правило, дегазируют ультразвуком или гелием, или же пропускают через мембраны. В связи с тем, что с увеличением давления ускоряют­ся процессы коррозии, компоненты колонки должны быть инертными. Чаще всего для этого используют сапфир, тефлон или специальные сплавы.

Входящие в систему ВЭЖХ насосы имеют, как минимум, двух-поршневую конструкцию для обеспечения потока без пульсаций. Ши­рокое применение также находят насосы с впрыском, который регули­руется электроникой.

Дата добавления: 2013-12-12