Методы микрургии (микрохирургия)

Экспериментальные методы, и в первую очередь разнообразные операции на клетках (микрооперации), стали применяться цитологами уже во второй половине прошлого столетия. Первые микрооперации проводились на сравнительно крупных объектах, например на развивающихся клетках различных животных, без использования каких-либо специальных приспособлений и при небольших увеличениях лупы или препаровального микроскопа. Микрооперации на крупных клетках и до сих пор проводятся вручную без каких-либо сложных приборов.

Примерами таких микроопераций могут служить разрушение и отделение бластомеров в процессе развития зародыша, разнообразные операции на одноклеточной водоросли Acetabularia и инфузории Stentor, у которых благодаря крупным размерам клеток проводится вручную даже пересадка ядер.

Микрооперации на отдельных клетках мелких размеров стали проводить только в начале нашего столетия, когда был сконструирован прибор, называемый микроманипулятором.

В настоящее время имеется несколько моделей микроманипуляторов. Одна из них изображена на рисунке. Микроманипуляторы позволяют проводить очень тонкие операции над клеткой и ее органоидами.

Для этих операций требуются большие увеличения микроскопа и специальные микроинструменты, которые чаще всего изготовляются самим экспериментатором из тонких стеклянных нитей или палочек.

Примерами основных микроопераций на клетке могут служить следующие: разрезание клеток простейших и многоклеточных организмов на части с целью изучения роли этих частей в процессе жизнедеятельности клетки; уколы, разрушение, а также удаление отдельных частей клетки для выяснения вопроса об их физиологической роли; извлечение частей клетки для последующего ультрахимического анализа; введение в клетку витальных красителей с целью детального исследования процесса окраски, а также для определения клеточного рН; введение в клетку мельчайших кусочков никеля или железа для определения вязкости цитоплазмы по скорости движения этих кусочков при центрифугировании клеток; введение в клетки различных фармакологических препаратов.

Методы микрургии широко применяются и для выделения тканевых клеток или одноклеточных организмов при переносе их в новую культуральную среду или в организм животного, что особенно важно для получения клонов. Наконец, к числу сложных микрургических операций, которые начали применяться сравнительно недавно, относится извлечение и трансплантация ядер, ядрышек и других органоидов клетки. Для этих операций пригодны главным образом крупные клетки простейших и других одноклеточных организмов, а также и крупные клетки некоторых многоклеточных животных, например амфибий. Так осуществляется перемещение ядра из одной амебы в другую, перемещение макронуклеуса инфузорий (Stentor, Euplotes) из одной особи в другую.

Операции по пересадке ядер дают возможность изучить роль ядра и цитоплазмы в жизни клеток, изучить изменения, происходящие в безъядерных клетках, выяснить участие ядра и цитоплазмы в передаче по наследству тех или иных признаков.

Дата добавления: 2014-01-06