Работа 2. Односторонняя проницаемость биологических мембран. Опыт Вертгеймера

Биологические мембраны обладают избирательной и односторонней проницаемостью. Свойство односторонней проницаемости тканевых мембран можно наблюдать в опыте Вертгеймера.

Цель работы: пронаблюдать одностороннюю проницаемость биологических мембран.

Необходимо для работы: препаровальный набор, лягушка, два стеклянных цилиндра, заполненные физиологическим раствором и прикрытые пробковыми кольцами, вата, мелкие гвозди, 1%-ный раствор метиленовой сини, пипетка с резиновой грушей, салфетки.

Проведение работы: Готовят два мешочка из кожи задних лапок лягушки. Для этого лягушку обездвиживают обычным путем, ножницами перерезают позвоночник выше крестцовых костей, рассекают лягушку поперек и удаляют внутренности.

Пальцами левой руки захватывают крестцовую кость, пальцами правой руки – кожу (через салфетку) и осторожно снимают ее до голеностопных суставов. В области коленных суставов кожа снимается с большим трудом, поэтому для сохранения целостности кожных мешочков требуется особая осторожность (можно острыми ножницами рассекать ткани, связывающие кожу с суставной сумкой).

Голени перерезают на уровне голеностопных суставов. Оставшиеся стопы являются естественной "пробкой" кожных мешочков.

Продольным разрезом снятую кожу разделяют на два мешочка. Один мешочек используется для работы вывернутым, а другой мешочек – невывернутым. Мешочки продевают в пробковые кольца, расправляют края кожи так, чтобы вход в мешочки был открыт, и прикрепляют их к пробке мелкими гвоздями (иглками).

Затем мешочки погружают в цилиндры с физиологическим раствором и с помощью пипетки с грушей их заполняют раствором метиленовой сини. Необходимо следить за тем, чтобы краска не попала в физиологический раствор и не окрасила кожу снаружи.

Через несколько минут кожа невывернутого мешочка окрашивается снаружи и минут через 20-30 краска окрашивает физиологический раствор в цилиндре, а вывернутый мешочек не окрашивается и краска в физиологический раствор не выходит.

Демонстрация нарушения односторонней проницаемости биологических мембран. Кожный мешочек, обработанный крепким раствором серной кислоты (для этого вывернутый и невывернутый кожные мешочки предварительно помещают в 10% раствор серной кислоты), теряет свойства односторонней проводимости и свободно пропускает метиленовую синь в двух направлениях.

Готовят кожные мешочки обработанные H₂SO₄ и проделывают опыт с изучением проницаемости кожной мембраны: зарисовывают схему опыта; наблюдают выход метиленовой сини из неживых кожных мешочков.

Дата добавления: 2014-11-16