Необходимые материалы

1. Для работы по методу Фроста. Обезжиренные предметные стекла, пипетки стерильные на 1 мл градуированные, водяная баня с термометром, РПА, колбы с 90 и 100 мл стерильной воды, пробирки с 9мл стерильной воды, стерильная ступка с пестиком, стерильный песок, весы с разновесами.

2. Для работы чашечным методом потребуется все вышеперечисленное и стерильные чашки Петри.

3. Для работы арбитражным (капельным) методом: чашки Петри с пластинками РПА, стерильные микропипетки на 0,01 мл или калиброванные биологические петли, материалы для выполнения разведения (см.1).

4. Выявление сальмонелл. Среды: Мюллера, ВСА, Эндо, Плоскирева, трехсахарный агар по Олькеницкому, специфичная сыворотка для сальмонелл.

5. Выявление протеев. Свежескошенный РПА, стерильная градуированная пипетка на 1 мл, индикаторные бумажки на сероводород и индол.

6. Выявление золотистого стафилококка. РБ+6,5% хлористый натрий, косой РПА, МСА, ЖСА или другая среда для выявления патогенных стафилококков, 3% р-р Н₂О₂, покровные стекла, плазма крови кролика.

Для проведения всех анализов потребуются красители для окраски мазков по Граму, микроскоп, иммерсионное масло, фильтровальная бумага, марля, хозяйственное мыло для обезжиривания стекол, восковые карандаши, дезраствор, посуда с мыльным раствором для сбора отработанных окрашенных стекол.

Состав питательных сред

Среда Мюллера: В стерильную колбу отвешивают 4-5 г химически чистого мела, затем в колбу наливают 90 мл РПБ, стерилизуют 20 мин при 120⁰С. В градуированный цилиндр берут 50 г гипосульфита и добавляют до 100 мл дистиллированной воды. После растворения гипосульфита раствор переливают во флакон и стерилизуют текучим паром. Затем готовят раствор Люголя следующего состава: 25 г кристаллического йода, 20 г йодистого калия, 100 мл дистиллированной воды. В колбу с мелом добавляют 2 мл раствора Люголя и 10 мл раствора гипосульфита, смесь взбалтывают и разливают в пробирки по 10-15 мл. ВСА (висмут-сульфитный агар), среда Эндо, среда Плоскирева готовятся из сухих смесей.

Трехсахарный агар по Олькеницкому. К 100 мл РПА с рН 7,2 - 7,4 прибавляют 1г лактозы, 0,02 г соли Мора, 0,03 г гипосульфита, 1 г сахарозы, 0,1 г глюкозы, 1 г мочевины и 0,4 мл фенолового красного (4% р-р). Соль Мора и гипосульфит предварительно растворяют в дистиллированной воде. Углеводы и мочевину также растворяют в небольшом количестве воды в колбе на водяной бане. Все ингредиенты хорошо перемешивают с агаром, а затем фильтруют через стерильную марлю и устанавливают рН 7,2 - 7,4. Добавляют индикатор и разливают в пробирки. Для приготовления индикатора 0,1 г фенолового красного растворяют в 25 мл стерильной дистиллированной воды. Если феноловый красный щелочерастворимый, то 0,1 г его растирают в ступке с 5,7 мл 1/20 Н раствора едкого натра. Готовая среда должна быть бледно-розового цвета.

Молочно-солевой агар (МСА). К 100 мл РПА добавляют 6,5 г хлористого натрия и 10% стерильного молока. Тщательно перемешивают, разливают в чашки Петри и 10 - 15 минут подсушивают в термостате.

Дата добавления: 2015-07-02