ТП 8.5. Вирощування посівного матеріалу в посівному апараті об’ємом 1000 л

ТП 8.4. Вирощування посівного матеріалу в посівному апараті об’ємом 100 л.

Об’ємом 10 л.

ТП 8.3. Вирощування посівного матеріалу в інокуляторі

ТП 8.1. Вирощування посівного матеріалу для засіву колб

Культуру L. mesenteroides PCSIR-4 засівають на скошене агаризоване середовище (ГКА) та вирощують протягом 18 годин при температурі 26°С та рН 5,5.

ТП 8.2. Підготовка поживного середовища та вирощування інокуляту в колбах на качалках

В колбу місткістю 3 л зливаємо стерильні розчини А, Б, В від ДР 7.1.4. Розливаємо дане поживне середовище (при палаючих пальниках) по 200 мл в качалочні колби місткістю 750 мл. Будемо мати 3 колби. В стерильних умовах в кожну качалочну колбу вносимо посівну культуру L. mesenteroides вирощену на скошеному агаризованому середовищі (ГКА) в пробірках (13 пробірок з культурою). Колби ставимо на качалки з частотою обертання 250 об/хв.

Стерильні розчини А, Б, В від ДР 7.2.1., ДР 7.2.2., ДР 7.2.3 зливаємо у посівний апарат (Р-34), де міститься стерильний, охолоджений розчин солей, місткістю 10 л. Потім вносимо 0,6 л посівного матеріалу, приготовленого на попередньому етапі ТП 8.2. Культивування проводиться протягом 18 годин при Т = 26 ± 1 °С при постійному перемішуванні (частота обертання 250 об/хв) і подачі очищеного повітря від ДР 3.8., рН = 5,5 – 5,6 на сталому рівні.

Піногасник вносимо тільки за необхідності, спостерігаючи за протіканням технологічного процесу. Піногасник (ДР 5.2) вноситься в розрахунку 0,01 піногасника від загального об’єму поживного середовища.

Даний етап проводять у посівному апараті (Р-35) об’ємом 100 л. Після змішування всіх компонентів середовища від ДР 7.3.1., ДР 7.3.2., додається посівний матеріал зі стадії ТП 8.3. по посівнійлінії, що знаходиться під паровим захистом. Культивування проводиться протягом 18 годин при Т = 26 ± 1 °С, рН = 5,5 ± 0,1 при постійному перемішуванні (частота обертання 250 об/хв) і подачі очищеного повітря від ДР 3.8.

Піногасник вносимо тільки за необхідності, спостерігаючи за протіканням технологічного процесу. Піногасник (ДР 5.2) вноситься в розрахунку 0,01 піногасника від загального об’єму поживного середовища.

Для приготування даної кількості посівного матеріалу, у ферментер (Р-36)об’ємом 1000 л до простерилізованого розчину солей, подаємо (через з’єднувальні трубки) сахарозу та дріжджовий екстракт з пептоном від ДР 7.4.1., 7.4.2. Далі додаємо інокулят у кількості з попередньої стадії ТП 8.4. Культивування проводиться протягом 18 годин при Т = 26 ± 1 °С, рН = 5,5 ± 0,1 при постійному перемішуванні (частота обертання 250 об/хв) і подачі очищеного повітря від ДР 3.8.

Піногасник вносимо тільки за необхідності, спостерігаючи за протіканням технологічного процесу. Піногасник (ДР 5.2) вноситься в розрахунку 0,01 піногасника від загального об’єму поживного середовища.

Дата добавления: 2015-08-31