Хід роботи. Реактиви: 1 М розчин сахарози, дистильована вода (у кількох ємностях)

Реактиви: 1 М розчин сахарози, дистильована вода (у кількох ємностях).

Матеріали й обладнання: живі листки, плоди, коренеплоди, бульби картоплі, рефрактометр, пробкові свердла діаметром 7-8 мм, препарувальні голки, термометр, бюретки на 25 мл з лійками (або піпетки на 5 і 10 мл), дворядні штативи з великими та маленькими пробірками (по 7 штук у штативі), пробки до пробірок, маркер, фільтрувальний папір.

Рослинних об'єктів

Робота 10. Рефрактометричний метод визначення сисної сили

Контрольні питання

1. Які речовини визначають осмотичний потенціал клітин?

2. Що таке осмотична система?

3. Чи існує залежність між розміром осмотичного потенціалу й концентрацією клітинного соку?

4. Як змінюється осмотичний потенціал клітинного соку в рослин різних місць зростання (солончаках, незасолених місцях, рослин степу)?

5. Як змінюється осмотичний потенціал клітинного соку при зів’яненні рослин або насиченні клітин водою?

Основні відомості. Сила, з якою клітина здатна поглинати воду, називається сисною силою клітини. На відміну від будь-якого розчину, сисна сила якого чисельно дорівнює його осмотичному тиску, сисна сила рослинної клітини, целюлозна стінка якої перешкоджає надходженню води, дорівнює різниці між осмотичним тиском клітинного соку (Р) і тургорним тиском (Т):

S клітини = Р – Т.

При зануренні клітин у будь-який розчин водообмін між цими системами визначається співвідношенням їх сисних сил: вода пересувається в той бік, де більша концентрація розчину й знижена активність молекул води.

Для визначення сисної сили клітин шматочки досліджуваної тканини занурюють у ряд розчинів відомої концентрації й підбирають такий розчин, сисна сила якого дорівнює сисній силі клітин.

Якщо занурити рослинну тканину в розчин, сисна сила якого більше сисної сили клітин, то розчин буде відсмоктувати воду із клітин, внаслідок чого його концентрація зменшиться. Навпаки, якщо сисна сила клітин більше сисної сили розчину, то клітини всмоктують воду з розчину, який стає при цьому більш концентрованим. При рівності сисних сил клітин і розчину не відбувається ні усмоктування, ні відбирання води, у результаті чого концентрація розчину залишається без змін. Величина цієї концентрації використовується для розрахунків осмотичного тиску (сисної сили) розчину, а отже сисної сили клітини. У цій роботі зміни концентрації розчину встановлюють шляхом визначення його показника переломлення за допомогою рефрактометра.

Ретельно вимити пробірки (7 звичайних та 7 маленьких), сполоснути їх дистильованою водою, висушити в сушильній шафі та забезпечити написами. Змішуючи відповідні кількості молярного розчину сахарози та дистильованої води, приготувати по 10 мл розчинів наступних концентрацій: 1; 0,9; 0,8; 0,7; 0,6; 0,5; 0,4; 0,3; 0,2; 0,1 моль/л. Для приготування розчинів необхідно використовувати великі пробірки. Після ретельного перемішування відлити в маленькі пробірки по 1 мл приготовлених розчинів і закрити пробірки пробками.

Вирізати за допомогою гострого пробкового свердла диски з листків недалеко від середньої жилки, не захоплюючи по можливості великих жилок (для цього повернути листи нижньою стороною нагору й покласти під листи пробку). Можна використовувати диски з інших тканин рослин. Розкласти по три диски (листків) у маленькі пробірки, закрити їх пробками. Витримати диски в розчинах 30-40 хв, час від часу струшуючи пробірки й стежачи за тим, щоб диски були занурені в розчин. Протягом зазначеного часу бажано визначити за допомогою рефрактометра концентрації вихідних розчинів у великих пробірках. Наприкінці досліду вийняти проби з розчинів препарувальною голкою й закрити пробірки пробками.

Дата добавления: 2015-06-28