Виділення казеїну молока

У молоці загальний вміст білків знаходиться, як правило, в межах 2,9-4,0%. Білки молока ділять на дві групи: казеїнові і сироваткові. Серед білків молока розглядають: основних білків: казеїни (αs1-, αs2-, β-), сироваткові білки (β-лактоглобулін, α-лактоальбумін), альбумін сироватки крові, імуноглобуліни, β2-мікроглобуліну, лактоферин, церулоплазмін і компонент 3 протеозопептонів. Основний білок коров'ячого молока - казеїн - є фосфопротеїдом. На його частку припадає близько 80% білкового азоту молока. Казеїни - це група гетерогенних фосфопротеїдів, самоасоціюючих в міцели в присутності кальцію, цитратів і фосфатів. Основна частина казеїну (близько 95%) в молоці міститься у вигляді казеїнових міцел. Міцели з'єднані між собою за допомогою кальцію і міцелярного фосфату.

Варіант I

Матеріали, реактиви, обладнання:

Молоко (сире), дистильована вода, 1% -ний розчин соляної кислоти, 10%-ний розчин гідроксиду натрію, біуретовий реактив, молібденовий реактив на фосфорну кислоту, хімічні стакани, піпетки, зворотній холодильник, фільтри паперові, пробірки, штатив, піщана баня, лакмус,

В хімічний стакан місткістю 50 мл відмірюють циліндром 3 мл молока і додають 7 мл дистильованої води. Суміш перемішують і додають 10-15 крапель 1% -ного розчину соляної кислоти. Кислоту доливають акуратно, по краплях, так як в надлишку кислоти осад розчиняється. Суспензію перемішують, через 3-5 хвилин утворюється пухкий осад. Для видалення соляної кислоти в склянку додають 10 мл дистильованої води, перемішують і залишають ще на 5 хвилин. Рідину обережно зливають з осаду. До осадку ще раз додають 10 мл дистильованої води, обережно перемішують вміст склянки і через 5 хвилин фільтрують суміш через паперовий фільтр. Доказом того, що до складу казеїну входить фосфор: осад з фільтром переносять у широку пробірку зі зворотним холодильником і додають 6 мл 10%-ного розчину гідроксиду натрію. Пробірку нагрівають на піщаній бані протягом 1 години. Рідини дають охолонути і нейтралізують її концентрованої азотної кислотою до слабокислою реакції на лакмус. При нейтралізації випадає осад високомолекулярних продуктів неповного гідролізу білка. Після відстоювання рідину фільтрують і з фільтратом проробляють біуретову реакцію і молібденову пробу на фосфорну кислоту. До 5 крапель гідролізату додають 10%-ий розчин NaOH і 2 краплі 1%-ого розчину CuSO4.Спостерігається фіолетове забарвлення. До 10 крапель молібденового реактиву додають 5 крапель гідролізату і кип'ятять кілька хвилин. У присутності H₃PO₄ рідина забарвлюється в лимонно-жовтий колір. При охолодженні випадає жовтий кристалічний осад комплексної сполуки (NH₄)3PO₄ (12MoO₃).

Варіант II

До 50-ти мл свіжого молока додають рівний об'єм насиченого розчину сульфату амонію. При цьому випадають в осад альбуміни і казеїн. Відфільтровують через складчастий паперовий фільтр розчин альбуміну.

Дата добавления: 2017-01-14