Строение бактерий при продольном срезе

Объяснение механизмов, лежащих в основе окраски по Граму

Клеточная стенка грамотрицательных микроорганизмов

• Один слой муреина (10% вещества клеточной стенки)
• Видоспецифичность каркаса отсутствует
• Между полисахаридами ковалентная связь
• Высокая плотность липопротеидов
• Снаружи каркаса липополисахариды
• Наличие ионов кальция

Разрушение клеточной стенки под действием химических веществ (преимущественное действие на грамположительных бактерий

Лизоцим разрушает мурамовый мешок.

Пенициллин нарушает образование клеточной стенки, препятствуя поперечной сшивке молекул.

Объяснение 1. Если после первого этапа окраски (краситель генциан-виолет) добавить лизоцим – вещество разрушающее клеточную стенку, протопласт остается окрашенным, следовательно, окрашенный комплекс находится на поверхности протопласта и у грамположительных бактерий удерживается за счет клеточных стенок, у грамотрицательных клеточные стенки не обладают таким свойством. В последующем было показано, что характер окраски полностью коррелирует с особенностями строения клеточной оболочки.

Объяснение 2. Считается, что кристаллический фиолетовый более прочно удерживается в гидрофильной области многослойного пептидогликана и тейховых кислот грамположительных бактерий и медленнее вымывается при обесцвечивании органическими растворителями. Вымывание же из липофильной наружной мембраны грамотрицательных бактерий происходит очень быстро, микроорганизмы утрачивают цвет, а при обработке сафронином (фуксином) обретают красное окрашивание. Следовательно, наиболее критичным этапом окрашивания является обесцвечивание, что может стать причиной грамвариабельности при окрашивании по Граму:

Для многих микроорганизмов на разных этапах роста характер реального окрашивания может не соответствовать строению клеточной стенки. Возможны также пародоксальные ситуации, так Mobiluncus выглядит как грамотрицательный микроорганизм, имея строение клеточной стенки как у грамотрицательных бактерий.

Грамположительные бактерии:

• Цитоплазма
• Цитоплазматическая мембрана, представляющая собой липидный бислой
• Многослойный пептидогликан - каркасная структура - параллельные цепи молекул аминосахаров, связанные поперечными сшивками пептидной природы
• Слой тейхоевых кислот (липотейхоевых, тейхуроновых)
• Аморфная полисахаридная капсула крахмалоподобной природы

Грамотрицательные бактерии:

• Цитоплазма
• Цитоплазматическая мембрана, представляющая собой липидный бислой
• Однослойный пептидогликан
• Внешная мембрана. По химической природе является липополисахаридом (ЛПС-биологический полимер, состоящий из липидного фрагмента и полисахаридной цепи). ЛПС слой непроницаем для гидрофильных веществ, их транспорт осуществляется через пориновые каналы Порины – каналы, заполненные водой, пропускающие гидрофильные низкомолекулярные соединения

Дата добавления: 2014-01-20