Исследование семенной жидкости

Общеклинические исследования жидкости из сустава

Показания к пункции сустава:

v Моноартрит неясной этиологии

v Неприятные ощущения в пораженном суставе (при установленном диагнозе)

v Контроль эффективности лечения при инфекционном артрите

v Дифференциальная диагностика артрита и артроза

n Изменения синовиальной жидкости при артрите и артрозе

Признак	Тип изменений
Невоспалительный	Воспалительный	септический
Цвет	Соломенно-желтый	Желтый	Варьирует
Прозрачность	Прозрачная	Полупроз-рачная	Мутная
Лейкоциты, в 1 мкл	200 - 2000	2000 - 75000	› 75000
Нейтрофилы, %	‹ 25	40 - 75	› 75
Кристаллы	Нет	Иногда	Нет
Бактериологический посев	Отрицательный	Отрицательный	Иногда положительный
Заболевания	Остеоартроз, травмати-ческий артроз, асептический некроз, СКВ	РА, подагра, псевдоподагра, СКВ, серонегативные спондилоартро-патии	Гонококковый артрит, инфекционный артрит (стафилококко-вый и стрептококковый)

n Особенности СА при РА

Проводится для подтверждения диагноза и определения местной активности воспалительного процесса.

Характерные показатели при РА:

Ø Лейкоциты, в 1 мкл – до 25 000 за счет Нф

(25-90%)

Ø Белок – 40-60 г/л

Ø В цитоплазме лейкоцитов – включения, вакуоли, похожие на кисть винограда (рагоциты). Это клетки, фагоцитировавшие липидные или белковые вещества, РФ, ИК, комплемент. Встречаются и при других артритах, но при серопозитивном РА – 70 и более %.

n Клетки синовиальной жидкости в нативном препарате. Ревматоидный артрит.

Подсчет рагоцитов производится в нативном препарате на иммерсии. Результат выражают в % по отношению к другим

клеткам. Рагоциты (в центре) крупнее лейкоцитов. В цитоплазме видна объемная, крупная, преломляющая свет зернистость.

n Особенности СА при инфекционных артритах

Исследование показано для контроля за эффективностью лечения

Наиболее выраженные изменения при бактериальных артритах:

Ø Внешний вид гноя

Ø Лейкоциты, в 1 мкл – до 50000-100000 (нейтрофилы более 80%)

Ø Бактериальный посев – положителен

n Синовиит, вызываемый кристаллами

Подагра, псевдоподагра, апатитная болезнь.

Диагностика подагры и пседоподагры: исследование синовиальной жидкости в поляризационный микроскоп (кристаллы, фагоцитированные Нф). При подагре – кристаллы уратов (игольчатые, сильное отрицательное двойное лучепреломление). При псевдоподагре – кристаллы пирофосфата кальция дигидрата – форма разнообразная, слабое положительное двойное лучепреломление. Комплексы, содержащие гидроксиапатит не выявляются при световой микроскопии (только электронная)

Показания к исследованию семенной жидкости

Основное показание – диагностика бесплодия (до 40% бесплодных браков зависят от мужчин). Исследование предшествует обследованию женщины. Если при однократном исследовании патологии не выявляют – анализ необходимо повторить.

Сперма (эякулят) состоит из сперматозоидов, взвешенных в жидкой фазе.

Состав эякулята:

Ø 5% - сперматозоиды

Ø 60% - содержимое семенных пузырьков

Ø 20% - секрет простаты

Ø 15% - секреты придатков яичек, семявыносящих протоков, уретральных желез

Получение эякулята

Сбор спермы – оптимально в лаборатории при мастурбации, допустимо самостоятельно (срок доставки не позднее 2-х часов, не подвергая большим колебаниям температуры). Перед сбором спермы необходимо 3-дневное половое воздержание (более длительное не рекомендуется).

Схема исследования эякулята

v Макроскопическое исследование

v Определение количества сперматозо-идов и их подвижности

v Оценка морфологии сперматозоидов

v Оценка биохимических показателей спермы

Макроскопическое исследование эякулята

Осмотр – вязкая непрозрачная жидкость (или сгусток) беловатого цвета.

Объем эякулята в норме - 3-5 мл.

Увеличение - полиспермия наблюдается редко, не говорит о полноценности эякулята.

Уменьшение – олигоспермия – встречается чаще. Количество сперматоизоидов может быть нормальным. Имеет следствием нарушение продвижения сперматозоидов к цервикальному каналу (недостаточно для нейтрализации кислой РН влагалища). Наблюдается у пожилых (снижение функции предстательной железы и семенных пузырьков).

Объем менее 1 мл - атрофия яичек или андрогенная недостаточность.

Макроскопическое исследование эякулята (продолжение)

Свертывание: Норма – свертывается, через 20-30 минут разжижается (действие фибриназ секретов простаты). Если через 40 минут эякулят не разжижается - поражение простаты и семенных пузырьков.

РН нормального свежего эякулята - 7,2-7,6, при стоянии защелачивается. При РН 6,0 и менее наблюдается некроспермия.

Определение количества сперматозоидов

Количество сперматозоидов определяют в счетной камере после разбавления семенной жидкости специальным раствором (двууглекислый натрий — 5 г; формалин нейтральный — 1 мл; дистиллированная вода — до 100 мл). Подсчет по расположению головок в сетке камеры.

Норма: 60 до 150 млн/мл (150-600 млн/эякулят) - нормозооспермия.

Олигозооспермия – концентрация сперматозоидов ниже 20 млн/мл

Оценка подвижности сперматозоидов в счетной камере

Производится по подсчету процента неподвижных клеток в счетных камерах после разбавления спермы в 20 раз теплым хлоридом натрия. Расчет по формуле –

где а – количество неподвижных сперматозоидов,

в – общее количество сперматозоидов.

Результат выражают в процентах.

Норма – не более 10-20% неподвижных.

Увеличение количества мертвых сперматозоидов – некроспермия.

Оценка характера подвижности сперматозоидов

Кинезисграмма – процентное соотношение сперматозоидов с различной подвижностью.

Каплю спермы поместить на предметное стекло, накрыть покровным, микроскопировать не менее 200 сперматозоидов в нескольких полях. Оценка визуально в баллах.

Оценка характера подвижности сперматозоидов (продолжение)

Подвижность сперматозоидов в норме сохраняется 24 часа при комнатной температуре.

3 вида подвижности:

• активно подвижные сперматозоиды – быстрое целесообразное поступательное движение с перемещением

• сперматозоиды подвижны, но не обладают способностью к поступательному перемещению (маятникообразные движения)

• сперматозоиды неподвижны все.

Сперма считается патологической, если меньше 60% сперматозоидов имеют поступательное движение в пробах, исследованных не позднее 2 ч от момента сбора.

Снижение активно подвижных сперматозоидов - астеноспермия.

Определение мертвых и живых сперматозоидов по Блуму

Принцип: эозин (или смесь эозина с нигрозином) проходит через мембрану мертвых клеток, окрашивая их, живые не окрашиваются.

Приготовление препарата: капля спермы+краситель→ мазок, высушивание, окрашивание, микроскопия (иммерсия). Подсчет не менее 200 клеток. Мертвые – краснофиолетовые, живые – бесцветные.

Норма: 90-95% живых клеток.

Оценка морфологии сперматозоидов

Оценивают форму и строение сперматозоидов.

Приготовление препарата: каплю свежей спермы на предметное стекло, высушить, фиксировать (этанол+эфир), окрасить по Романовскому, микроскопировать. Подсчет не менее 200 клеток.

Норма: аномальных форм (микроголовка, макроголовка, расщепление головки, нет акросомы, аномалии шейки и т.д.) не более 15%.

Тератоспермия – увеличение аномальных форм сперматозоидов.

Клетки сперматогенеза в эякуляте

Обнаруживаются при микроскопии окрашенных мазков.

Норма: 0,5-2%, чаще всего сперматиды, сперматоциты.

Увеличение – при форсированном сперматогенезе.

Азоспермия – нарушение созревания сперматозоидов – увеличивается содержание молодых форм при отсутствии зрелых.

Аспермия – не обнаруживаются ни клетки сперматогенеза, ни сперматозоиды (атрофия гонад, закупорка семявыносящих протоков).

Другие клеточные элементы
в эякуляте

Лейкоциты – в норме до 5-6 в поле зрения. Если больше - пиоспермия, сопровождает ряд воспалительных процессов мужских половых органов.

Эритроциты - в норме нет, могут появляться при воспалительных процессах, варикозном расширении вен, при опухолях, камнях.

Биохимические показатели спермы - фруктоза

Фруктоза – основной углевод, содержащийся в сперме. Определяют колориметрическим методом.

Норма – не менее 1,3 мкмоль/эякулят.

Клиническое значение – уменьшение уровня фруктозы в сперме наблюдается при недостаточности тестостерона, нарушениях функции семенных пузырьков.

Биохимические показатели спермы – лимонная кислота

Служит показателем функционального состояния предстательной железы, при простатитах значительно снижается.

Определение: эякулят центрифугируют для получения плазмы, осаждают белки (ТХУ), определяют содержание лимонной кислоты с помощью тест-системы.

Норма: более 52 мкмоль (10 мг)/эякулят.

Биохимические показатели
спермы – цинк

Является показателем секреторной способности предстательной железы.

Определение: эякулят центрифугируют для получения плазмы, разводят дистиллированной водой, определяют содержание цинка с помощью тест-системы (подготовленные пробы можно сохранять замороженными).

Норма: более 2,4 мкмоль /эякулят

Тесты для выявления антиспермальных антител

АТ в семенной плазме чаще IgA и IgG.

Смешанный антиглобулиновый тест

На предметное стекло наносят:

Ø 1 кп свежей спермы;

Ø 1 кп латексных частичек с покрытием IgG

Ø 1 кп антисыворотки к человеческому IgG.

Смесь накрывают покровным стеклом, микроскопируют (400х).

Высчитывают процент сперматозоидов, к которым прикреплены латексные частицы, покрытые IgG.

Нормальные значения показателей спермы

Показатель	Нормальные значения
Объем	2 мл и более
рН	7,2-7,8
Концентрация сперматозоидов	Более 20 млн/мл
Общее кол-во сперматозоидов в эякуляте	Более 40 млн
Подвижность	50% и более с поступательным движением или 25% и более с быстрым поступательным движением, в течение часа после сбора проб
Морфология	50% и более с нормальной морфологией
Жизнеспособ-ность	50% и более живых
Лейкоциты	менее 1 млн/мл
Цинк (общий)	2,4 мкмоль и более на каждый эякулят
Лимонная кислота (общая)	52 мкмоль (10 мг) и более на каждый эякулят
Фруктоза (общая)	13 мкмоль и более на каждый эякулят
Тест-РСА	менее 10% с прилипшими к ним частичками

Номенклатура вариантов показателей спермы

Название	Вариант показателей спермы
Нормозооспермия	нормальный эякулят
Олигозооспермия	концентрация сперматозоидов ниже 20 млн/мл
Астенозооспермия	менее 50% сперматозоидов с поступательным движением или менее 25% с более быстрым линейным поступательным движением
Тератозооспермия	менее 50% сперматозоидов с нормальной морфологией
Олигоастенотера-тозооспермия	наличие нарушений всех трех показателей
Азооспермия	сперматозоиды в эякуляте отсутствуют
Аспермия	нет эякулята

Дата добавления: 2014-01-11