Проба на совместимость по АВО на плоскости при комнатной температуре

Реакция агглютинации на плоскости с помощью цоликлонов анти-D-супер

Определение Rh-принадлежности.

Учет результатов определения группы крови АВО

Определение группы крови АВО

При проведении иммуносерологических исследований руководствуются инструкциями, прилагаемыми к набору реагентов. Используют эритроциты и сыворотку крови реципиента со сроком хранения не более 2 дней при температуре 2-8С.

Техника иммуносерологических исследований

На пластинку в 3 точки под обозначениями О(I), A(II), B(III) помещают по 2 капли (0,1 мл) соответствующих гемагглютинирующих сывороток и рядом по 1 капле (0,01 мл) эритроцитов. Сыворотку и эритроциты перемешивают стеклянной палочкой. Пластинку периодически покачивают, наблюдая за ходом реакции 5 минут. По истечении 5 минут в реагирующую смесь можно добавить 1-2 капли (0,05-0,1 мл) физиологического раствора для снятия возможной неспецифической агрегации эритроцитов.

При использовании цоликлонов на пластинку в 3 точки под обозначениями анти-А, анти-В, анти-АВ помещают по 2 капли (0,1 мл) соответствующих цоликлонов и рядом по 1 капле (0,01 мл) эритроцитов. Цоликлоны и эритроциты перемешивают стеклянной палочкой. Пластинку периодически покачивают, наблюдая за ходом реакции 3 минуты.

Интерпретацию результатов производят по соответствующей таблице.

Таблица

Реакция исследуемых эритроцитов с цоликлонами	Реакция исследуемых эритроцитов с гемагглютинирующими сыворотками	Используемая кровь принадлежит к группе
Анти-А	Анти-В	Анти-АВ	О (I)	А (II)	В (III)
-	-	-	-	-	-	О (I)
+	-	+	+	-	+	А (II)
-	+	+	+	+	-	В (III)
+	+	+	+	+	+	АВ (IV)

При наличии агглютинации со всеми 3 реагентами необходимо исключить неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов. Для этого к капле эритроцитов вместо цоликлонов добавляют каплю физиологического раствора, а вместо гемагглютинирующих сывороток – сыворотку группы AB(IV). Кровь можно отнести к группе АВ(IV) только при отсутствии агглютинации эритроцитов в физиологическом растворе или сыворотке АВ(IV).

1. Нанесите большую каплю (около 0,1 мл) реагента на пластинку.

1. Нанесите рядом маленькую каплю (0,02-0,03 мл) исследуемых эритроцитов.
2. Тщательно смешайте реагент с эритроцитами стеклянной палочкой.
3. Через 10-20 сек мягко покачайте пластинку. Несмотря на то, что четкая агглютинация наступает в первые 30 сек, результаты реакции учитывайте через 3 мин после смешивания.

При наличии агглютинации исследуемая кровь маркируется как Rh-положительная, при отсутствии – как Rh-отрицательная.

Примечание: Для аттестации крови донора использования только данной методики недостаточно.

На пластинку наносят 2-3 капли сыворотки реципиента и добавляют небольшое количество эритроцитов с таким расчетом, чтобы соотношение эритроцитов и сыворотки было 1:10 (для удобства рекомендуется сначала выпустить через иглу несколько капель эритроцитов из контейнера на край пластинки, затем оттуда стеклянной палочкой перенести маленькую каплю эритроцитов и сыворотку). Далее эритроциты перемешивают с сывороткой, пластинку слегка покачивают в течение 5 мин., наблюдая за ходом реакции. По истечении указанного времени в реагирующую смесь можно добавить 1-2 капли физиологического раствора для снятия возможной неспецифической агрегации эритроцитов.

Учет результатов. Наличие агглютинации эритроцитов означает, что кровь донора несовместима с кровью реципиента и не должна быть ему перелита. Если по истечении 5 мин. агглютинация эритроцитов отсутствует, это означает, что кровь донора совместима с кровью реципиента по групповым агглютиногенам.

Дата добавления: 2014-01-14