РГА с аллантоисной жидкостью куриных эмбрионов, зараженных вирусом гриппа

Куриный эмбрион (КЭ)

Обозначьте на рис. структурные элементы КЭ:

а) хорионаллантоисная оболочка (за скорлупой);

б) аллантоисная полость (игла в ней;

в) амнион (вокруг эмбриона);

г) желточный мешок (напротив эмбриона).

Методы заражения куриных эмбрионов:	Материал вводят, вскрывая или не вскрывая скорлупу, в желточный мешок, на ХАО, в аллантоисную, амниотическую полости, тело эмбриона или эмбриону внутривенно.
Феномены, позволяющие выявить вирус в курином эмбрионе:	1.Недоразвитие или 2. Гибель (выявляются при овоскопии). 3.Изменение оболочек (вирусы оспы, герпеса). 4.Обнаружение включений вирусов в световом, электронном микроскопах, антигенов в ИЭМ, РИФ и др. 5.РГА с амниотической, аллантоисной жидкостью.

Принцип метода способность вируса гриппа (тропизм) агглютинировать эритоциты кур

Исследуемый материал вирусосодержащий материал (амниотичекая или аллантоисная жидкость)

Дополнительные ингредиенты реакции 1% суспензия отмытых эритроцитов кур

Разведение вируса	1/2	1/4	1/8	1/16	1/32	1/64	Контроль эритроцитов
1 кап. взвеси КЭ
Результат

Вывод: положительная РГА указывает на присутствие (индикация) вируса гриппа в исследуемом материале

2) Культура клеток

Первичные культуры клеток

Перевиваемые культуры клеток

Это клетки различного типа (почек обезьян, почек эмбриона человека, амниона человека, куриных эмбрионов). Срок жизни таких культур ограничен ≤ 10 пересевами. Лишь отдельные группы клеток первичных культур могут сохранить способность к росту и размножению и при многократных пересевах они дают начало перевиваемым культурам клеток.

Перевиваемые клеточные линиии характеризуются потенциальным бессмертием и гетероплоидным набором хромосом. Наиболее часто применяются такие линии перевиваемых клеток как RH - из почки человека; ВНК-21 - из почек однодневных сирийских хомяков; ПМС - из почки морской свинки, Vero – из почек зеленой мартышки и др. Полуперевиваемые культуры клеток (диплоидные) - клетки одного типа, способные in vitro выдерживать максимум 50 пассажей, сохраняя при этом свою исходную морфологию и диплоидный набор хромосом.

Дата добавления: 2014-11-20