Методические рекомендации по подготовке к занятию. Тема 5 Основные стадии эмбрионального развития

Тема 5 Основные стадии эмбрионального развития

Ферменты

Щелочная фосфатаза в клетках канальцев первичной почки плода свиньи

Кальций-кобальтовый метод Гомори

Гистохимическое исследование ферментов основано на использовании в реакции субстрата, иначе говоря, инкуба­ционной среды. Инкубация вызывает расщепление субст­рата и выпадение осадка, который дополнительными хими­ческими реакциями переводится в окрашенное соединение, видимое под микроскопом.

Интенсивность окраски и ее распространение дают возможность судить об активности и топографии фермента в клетках и тканях.

Литература: 6, с.28-29;

Контрольные вопросы:

1 Какой краситель используется в качестве ядерного красителя?

2 Фиксация смесью Карнуа?

3 Для чего используют метод Браше?

Цель:

- ознакомить с основными стадиями эмбрионального развития

План:

1Работа с микроскопом

2 Рассмотреть пстоянные препараты

Дробящиеся яйца морского ежа добывают с морским планктоном и отбирают под лупой. Материал можно окра­шивать кармином или гематоксилином, но можно рас­сматривать и без окраски, изготовляя тотальные препараты в бальзаме. Дробление у морского ежа на первых стадиях идет сходно с дроблением яиц ланцетника. Ввиду значи­тельной трудности получения дробящихся яиц ланцетника можно заменить их дробящимися яйцами морского ежа.

При слабом увеличении на препарате видны различные стадии дробления. Сначала надо постараться найти нераздробившееся (неоплодотворенное) яйцо. В нем легко различить цитоплазму и пузырьковидное ядро, в кото­ром заметно темное ядрышко. Затем нужно отыскать ста­дию двух бластомеров; у них в центре часто виден силуэт

митотической фигуры, показывающий подготовку бласто­меров к следующему делению. Можно найти и стадию разделения двух бластомеров, когда каждый из них делится поперечной перетяжкой, и, наконец, надо найти стадию четырех бластомеров, в каждом из которых виден силуэт ядра. Общий объем четырехбластомерной стадии не превышает объема нераздробившегося яйца.

Далее нужно отыскать стадию восьми бластомеров, когда бластомеры расположены в два ряда по четыре бластомера в каждом. Можно встретить стадию морулы. Каждую стадию нужно отыскивать при слабом увеличении, но зарисовку делать при сильном увеличении, помня при этом, что дело идет о толстом тотальном препарате, тре­бующем особенно бережного движения микрометричес­ким винтом, так как иначе препарат легко может быть раздавлен. Признаком полного дробления у рассматри­ваемого объекта является полное разделение зиготы на бластомеры; признаком равномерного дробления — оди­наковая величина получающихся бластомеров на ранних стадиях развития.

Литература 6, с 58-59

Контрольные вопросы:

1 Что такое дробление яиц?

2 Перечислите стадии дробления яйца?

Дата добавления: 2014-11-29