Электронная спектроскопия

Подготовка образцов для анализа

К образцам добавили по 1 мл воды. Ожидаемая концентрация соматотропина в образцах – 4 IU/мл (масса действующего вещества на флаконе не указана).

Образцы растворились хорошо, с образованием прозрачного раствора. В обоих образцах при встряхивании образовалось небольшое количество пены, что обычно для концентрированных белковых растворов (рисунок 3).

Рисунок 3 – Вид референтного и испытуемого образцов (дно флакона после растворения в воде и взбалтывания). Образец 1 (референтный) – слева, образец 2 (испытуемый) – справа. Оба образца заметно пенятся, что характерно для белковых растворов.

Для полученных растворов (ожидаемая концентрация соматотропина в обоих растворах 4 IU/мл) записаны электронные спектры поглощения в диапазоне 190-600 нм (длина оптического пути 1 мм). Результаты представлены на рисунке 4. В спектрах обоих образцов присутствует пик при длине волны 280 нм, что свидетельствует о наличии веществ пептидной/белковой природы. Концентрации соматотропина, как можно заметить из спектров различаются – референтный образец содержит больше соматотропина, чем образец испытуемый. Для количественного анализа обоих образцов в качестве образца сравнения использовали раствор препарата Humatrope (концентрация 10 мг/мл), ранее подвергнутого анализу.

Таблица 1. Количественный анализ образцов соматотропина.

Образец	Поглощение, 280 нм	Концентрация, мг/мл	Содержание, мг на флакон
Humatrope	0.837	10 (Ref)
Образец 1 (референтный)	0.136	1.62	1.62
Образец 2 (испытуемый)	0.108	1.29	1.29

Рисунок 4 – Электронные спектры поглощения водных растворов референтного и испытуемого образцов соматотропина.

Дата добавления: 2014-12-23