Метод Крафта

Определение алкалоидов

Химическая посуда, оборудование и другие материалы

В полевых условиях

Оборудование для проведения фитохимического анализа

Необходимые реактивы и

Реактивы:

1. Реактивы Вагнера, Майера, Драгендорфа.

2. Хлористоводородная кислота 1% раствор.

3. Хлористоводородная кислота 10% раствор.

4. Хлористоводородная кислота концентрированная.

5. Кремневольфрамовая кислота 1% раствор.

6. Изотонический раствор хлорида натрия.

7. Гидроксид натрия 10% раствор.

8. Железоаммониевые квасцы 1% раствор.

9. Вода дистиллированная.

10. Желатин 1% р-р в изото-ническом растворе.

11. Спирт этиловый 96%.

12. Спирт этиловый 24%.

13. Раствор Люголя.

14. Карбонат натрия 2% раствор.

15. Ацетат свинца насыщенный раствор.

16. Ссульфат натрия насыщенный раствор.

17. Пикриновая кислота 1% раствор.

18. Раствор Фелинга I.

19. Раствор Фелинга П.

20. Хлорид железа (III) 1% раствор.

21. Смесь уксусного ангидрида с кон-центрированной серной кислотой (50:1).

22. Серная кислота концентриро-ванная.

23. Сульфат железа (III) 10% раствор

24. Нитрат натрия 10% раствор

25. Бумага, пропитанная раствором Драгендорфа.

26. Бумага, пропитанная 0,5% раст-вором хлорида железа (III).

27. Цинк металлический.

(из расчета на одну группу

студентов)

1. Спиртовки - 5 шт.

2. Пробирки - 25 шт.

3. Часовые стекла - 25 шт.

4. Воронки для фильтрования - 5 шт.

5. Бумажные фильтры.

6. Гигроскопическая вата.

7. Полоски фильтровальной бумаги (1x10), пропитанные реактивом Дра­гендорфа (бумага Крафта).

8. Плоскогубцы.

9. Полоски фильтровальной бумаги (1x10) пропитанные 0,5% раствором хлорного железа.

10. Выпарительные чашки на 100 мл - 10 шт.

11. Треножники для спиртовок - 5 шт.

12. Аптечная сумка - 5 шт.

13. Стеклянные палочки - 5 шт.

14. Колбы на 100 мл - 10 шт.

15. Ручные весы - 5 шт.

16. Разновес - 2 шт.

17. Пипетки на 100 мл - 6 шт.

18. Водяная баня - 3 шт.

Метод Крафта может быть рекомендован в качестве полевого экспресс-метода для рекогнос-цировочной оценки растений на наличие алкалоидов.

а) каплю свежевыжатого из растения сока наносят на фильтровальную бумагу, пропитанную реактивом Драгендорфа. При наличии алка-лоидов в соке на бумаге появляется оранжевое пятно.

б) о наличии алкалоидов можно судить также по оранжевым пятнам, возни­кающим на местах сопри-косновения свежего растения и бумаги при их сжатии. Для проведения анализа методом Крафта необходимо иметь щипцы для сдавливания и индикаторную бумагу, качество которой имеет решающее значение.

Небольшой срез того или иного органа растения (лист, стебель, цветы) на­кладывают на полученную бумагу и с помощью плоскогубцев сдавливают. При наличии алка-лоидов, выступивший при сжатии сок окрашивает бумагу в оранжево-красный цвет. При наличии хлорофилла оранжевое окрашивание наблюдается в виде каймы вокруг зеленого пятна или в виде оранжево-красных участков между зелеными пятнами.

Способ приготовления бумаги. Полоски бумаги для хроматографии размером 10x70 см погружают в реактив, состоящий из смеси раствора А, раствора В и 40% уксусной кислоты, после чего высушивают в вертикальном положении при комнатной температуре до воздушно-сухого состояния, и разрезают на полоски размером 2,5х6 см. Бумага должна быть желтого цвета.

Раствор А: 0,42 г нитрата гидроксовисмута (III) растворяют в 25 мл 20% уксусной кислоты.

Раствор В: 8,0 г йодида калия растворяют в 20 мл дистил-лированной воды.

Примечание: названный метод не может быть применен к растениям, со­держащим пигмент, маскирующий на бумаге алкалоидную реакцию, а также к органам, выжать сок, из которых не всегда можно (семена, коры и т.д.)

Недостатком метода является нечувствительность реактивной бума-ги к эфедрину и псевдоэфедрину, вследствие чего алкалоидность раз-личных видов эфе­дры определению этим методом не подлежит.

Дата добавления: 2014-12-29