Бактеріофаги – це віруси, що репродукуються в клітинах бактерій

Етапи культурального методу

Імунна електронна мікроскопія

Електронна мікроскопія

Люмінісцентна мікроскопія

Сучасні методи лабораторної діагностики вірусних захворювань

Методи ідентифікації вірусів

Індикація вірусів – це виявлення вірусів у досліджуваному матеріалі без встановлення їх належності до родини, роду, виду, сероваріанту

• Методи індикації

• Цитопатична дія віруса (ЦПД) – загальні дистрофічні зміни клітин або специфічні ураження у вигляді включень або багатоядерних клітин – синцитіїв або симпластів

• Бляшкоутворення – бляшки – це осередки зруйнованих інфікованих вірусом клітин моношару, що заходиться під агаровим покриттям

• Кольорова проба – використовують середовища Ігла або 199, які містять індикатор, який реагує на зміну рН середовища. При появі в клітині метаболітів середовище змінює забарвлення на жовте (інфіковані вірусом клітини – не метаболізують)

• Реакція гемаглютинації (РГА) основана на спроможності деяких вірусів, що мають гемаглютинін в оболонці склеювати еритроцити

• Реакція гемадсорбції (РГадс) – дозволяє виявити віруси, які містять гемаглютинін у клітинних культурах до розвитку ЦПД. На інфікованих вірусом клітинах спостерігається адсорбція еритроцитів

• Ідентифікація вірусів – встановлення їх варіантної, видової, родової та родинної належності за допомогою діагностичних сироваток

• В основі лежить постановка серологічних реакцій

• Реакція нейтралізації (РН)

• Реакція гальмування гемадсорбції

• Реакція гальмування гемаглютинації

• Методи ідентифікації вірусів

• Реакція непрямої гемаглютинації

• Реакція зв’язування комплементу (РЗК)

• Імуноферментний аналіз (ІФА)

• Радіоімунний аналіз

• Методи ідентифікації вірусів

• Імунна електронна мікроскопія (ІЕМ)

• Реакція імунофлюоресценції (РІФ)

• Зустрічний імуноелектрофорез

• Метод молекулярної гібридизації НК

• Мікроскопічні методи

- цитоскопічний

• Культуральний метод (вірусологічний)

• Серологічний метод (РЗК, РГГА, РПГА, ІФА, РІА, імуноелектрофорез)

• Молекулярно-генетичний метод

- реакція гібридизації ДНК або РНК

- полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР)

• Забір матеріалу

• Обробка матеріалу з метою звільнення від супутньої бактеріальної мікрофлори

• Культивування вірусу

• Індикація і титрування вірусу

• Ідентифікація

• Бактеріофаги

Розрізняють:

• За вірулентністю

- вірулентні (спричиняють лізис клітини)

- помірні (інтегрують ДНК в геном, співіснують з клітиною в формі профага)

• За спектром дії

- полівалентні (інфікують бактерії одного роду)

- моновалентні (інфікують бактерії одного виду)

- типоспецифічні (інфікують бактерії певного варіанту одного виду)

• Будова бактеріофага

• Морфологічні групи бактеріофагів

• Ниткоподібні фаги

• Голівчасті з рудиментарним відростком

• Голівчасті з коротким відростком

• Голівчасті з нескорочувальним відростком

• Голівчасті з скорочувальним відростком і базальною пластинкою

• Етапи репродукції бактеріофагів

• Адсорбція

• Проникнення (ін‘єктування нуклеїнової кислоти)

• Репродукція

• Зборка вірусних фаговів у цитоплазмі бактерій

• Вихід фагових частинок із клітини після її лізису

• Помірні бактеріофаги завершують репродукцію на етапі інтеграції нуклеїнової кислоти в геном клітини-хазяїна

• Використання фагів

Моновалентні вірулентні фаги використовують для:

• Лікування і профілактики інфекцій

• Видової ідентифікації в діагностиці інфекцій

• Фаготипування епідемічних штамів збудників

Помірні фаги використовують:

• В генній інженерії для генетичних рекомбінацій

• Для отримання лізогенних культур-індикаторів мутагенних факторів

• 36. Ідентифікація вірусів. Реакції гемаглютинації, гальмування гемаглютинації, гемадсорбції, нейтралізації.

• Ідентифікація

• Бактеріофаги

Дата добавления: 2015-05-08