Бактериологическая диагностика

Клебсиеллы. Лабораторная диагоностика склеромы и озены

Бактерии рода Klebsiella включают в семейство Enterobacteriaceae. K.scleromatis является возбудителем склеромы, K.ozaenae - возбудитель озены, K.pneumoniae способна при определенных условиях вызывать у человека сепсис, воспаление легких, острые кишечные заболевания, пиелонефрит, цистит, перитонит, менингит и др. Клебсиеллы - это палочки длиной 1-5 мкм, эллипсоидные, неподвижные, без спор, капсула является у них постоянной структурой. Они растут на плотных средах в виде блестящих, влажных, серовато-белых колоний с перламутровым оттенком, слизистой консистенции. В бульоне - диффузное помутнение, иногда слизистое кольцо на поверхности. У клебсиелл слабо выражены протеолитические свойства и относительно хорошо гликолитические. Дифференциация клебсиелл.

Признаки	Ksubsp. rhinoscleromatis	K.subsp. ozaenae	K.subsp pneumonia
Глюкоза с газом	-	+ -	+
Лактоза	-	+ -	+
Сахароза (4 суток)	+	+ -	+
Цитрат аммония (среда Симмонса)		+ -	+
Мочевина	-	- +	+
Малонат натрия	+	-	+

Клебсиеллы содержат К - капсульный, О - соматический, СА - общий для энтеробактерий антиген. Род разделяется на 80 серологических вариантов. У клебсиелл склеромы обнаружен только один КЗ-антиген, идентичный с К-антигеном клебсиеллы пневмонии 3-го типа. У К.озены - К4, К5, либо К6-антигены. Клебсиеллы пневмонии - К-антигены 1-3 и 7-80. Известно 5 О-антигенов. К.склеромы имеют антиген О2А, К.озены - О2В, К.пневмонии - О-антигены 1, 3, 4, 5.

Питательные среды:

1. Дифференциально-диагностическая среда - ЛБТА (лактозобромтимоловый агар с пенициллином). Содержит МПА+ лактоза+бромтимоловый синий. К.склеромы, не разлагающая лактозу, дает колонии цвета среды, К.пневмонии - желтые, К.озены - либо желтые, либо цвета среды.

2. Модифицированная среда Ресселя кроме глюкозы (в столбике) и лактозы (в скосе) содержит индикатор бромтимоловый синий, соль Мора и гипосульфит (на H₂S). К. склеромы дает пожелтение только столбика, К. пневмонии - пожелтение и разрыв всей среды, К. озены - различные варианты.

3. Среда Симмонса для утилизации цитрата натрия (индикатор бромтимоловый синий). В положительных случаях появляется рост и среда синеет, в отрицательных случаях роста нет и среда не изменяется.

4. Среда с малонатом натрия (индикатор бромтимоловый синий). При утилизации малоната - среда интенсивно синего цвета, отрицательная реакция - среда желтая.

Лабораторная диагностика проводится двумя методами: бактериологический

и серологический.

Материал для исследования: содержимое носа, глотки, носоглотки.

Схема исследования:

1-й этап - посев материала петлей или тампоном на ЛБТА, или на пенициллиновый агар;

2-й этап:

а) учет роста на чашках. Колонии клебсиелл - крупные, выпуклые, влажные, блестящие. На ЛБТА цвет колоний зависит от вида клебсиелл;

б) посев колоний на модифицированную среду Ресселя или косой агар; 3-й этап - идентификация выделенной культуры:

а) мазок по Граму;

б) препарат по Гинса-Бурри;

в) определение биохимических свойств (см. таблицу); г) определение антигенной формулы с помощью клебсиеллезных сывороток О и К (р. агглютинации на стекле, РА в пробирках, РИФ).

Серологическая диагностика: используют РСК и РПГА со склеромным и

озенозным диагностикумами.

Дата добавления: 2015-07-02