Экспресс - анализ интоксикаций

Фармакологические пробы.

В том случае, если алкалоид оказывает характерное действие на живой организм, могут быть выполнены фармакологические пробы на животных, которые проводятся квалифицированным специалистом-фармакологом. Например, при доказательстве атропина капают водный раствор испытуемого вещества в глаз кошки. При наличии атропина наблюдается характерное стойкое расширение зрачка. Стрихнин и никотин, нанесенные на спинку лягушки, вызывают ее гибель в характерной позе («молящаяся лягушка» - стрихнин, «сидящая» - никотин).

Фармакологические пробы оказывают существенную помощь химику-эксперту при доказательстве алкалоидов. В ряде случаев эти пробы не менее чувствительны и более специфичны, чем химические реакции.

4. Количественное определение алкалоидов проводится фотометрическим и спектрофотометрическим методами (в видимой и УФ-областях спектра).

1. Определение в УФ-области (200-400 нм) проводится по специфическому поглощению (абсорбции) самого алкалоида при наличии у него хромофорной системы. Интенсивность поглощения пропорциональна концентрации. Расчет ведут по уравнению закона Бугера-Ламберта-Бера.

Определение проводится на спектрофотометре, т.к. закон Бера справедлив только для монохроматического излучения.

2. Определение в видимой области (400-800 нм) основано на измерении абсорбции окрашенных комплексов алкалоидов с кислотными реагентами (пикриновой кислотой, тропеолином-00, метиловым оранжевым, бромфеноловым синим и т.п.). В этом случае образуются ионные ассоциаты, для образования которых большое значение имеет рН среды, т.к. в момент реакции и алкалоиды, и реагенты должны быть ионизированы. Окрашенные ионные ассоциаты могут быть экстрагированы из водной фазы органическим растворителем. Такое определение носит название экстракционно-фотометрического.

Окрашенные продукты могут быть получены также в реакциях окисления, восстановления, конденсации, азотосочетания и некоторых других.

Измерение абсорбции можно вести как на фотоэлектроколориметрах, так и на спектрофотометрах.

Расчет концентрации проводится по калибровочной кривой. При использовании спектрофотометрии можно использовать уравнение Бугера-Ламберта-Бера.

Фотометрические методы анализа позволяют определять очень малые (несколько микрограммов) количества алкалоидов, но требуют высокой степени чистоты выделенного вещества, поэтому сочетаются с ХТС – очисткой полученных извлечений.

Широкое применение лекарственных средств в современной медицине создает возможности для острых отравлений в результате неправильного использования лекарств в целях самолечения и суицидальных попыток.

Острые отравления лекарствами занимают ведущее место среди бытовых интоксикаций в большинстве стран мира, особенно у детей, и представляют тяжелую форму патологии.

Диагностика отравлений направлена на установление природы яда и его количества. Она складывается из трех основных видов диагностических мероприятий:

1 - клинической диагностики, основанной на данных анамнеза (опроса), результатах осмотра места происшествия и изучения клинической картины для выделения специфических симптомов отравления. Этот вид диагностики проводится врачом на догоспитальном этапе или в стационаре.

2 - лабораторной диагностики, направленной на качественное и количественное определение токсических веществ в биологических средах организма (кровь, моча, спинномозговая жидкость), которая проводится химиками-токсикологами или химиками-экспертами.

3 - патоморфологической диагностики, направленной на обнаружение специфических посмертных признаков отравления каким-либо токсическим веществом, которая проводится судебно-медицинскими экспертами.

Определяющее значение в установлении природы яда имеет лабораторная токсикологическая диагностика, которая имеет 3 основных направления:

1. Специфические химико-токсикологические исследования для экстренного обнаружения токсических веществ в биологических средах организма (как качественно, так и количественно).

2. Специфические биохимические исследования с целью определения характерных для данной патологии изменений биохимического состава крови.

3. Неспецифические биохимические исследования для диагностики степени тяжести токсического поражения функции печени, почек и других систем.

Более подробно остановимся на видах химико-токсикологического анализа, используемых в диагностике острых отравлений, и на требованиях к нему.

Исследование должно проводиться в максимально короткие сроки (1-2 часа), а используемые методы должны обладать достаточной точностью (± 10%), специфичностью и высокой чувствительностью.

Этим требованиям отвечают физико-химические методы инструментального экспресс-анализа:

1. Тонкослойная хроматография (ТСХ)

2. Газожидкостная хроматография (ГЖХ)

3. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)

4. Спектральные методы анализа (спектроскопия в УФ- и видимой области спектра)

Выбор метода анализа диктуется в основном физико-химическими свойствами токсических веществ, а также способами их извлечения из биологической среды, представленной на исследование. Применение современных методов химико-токсикологического анализа в клинике, кроме обоснования клинического диагноза, позволяет осуществлять систематический контроль за динамикой выведения токсических веществ из организма при использовании различных способов искусственной детоксикации.

Для быстрого выполнения лабораторного анализа необходимо знать первичный клинический диагноз отравления, что обуславливает заказ на обнаружение определенного вида токсического вещества (барбитураты, фенотиазины и т.п.). Учитывая большое количество токсических веществ, которые могут вызвать отравление, ненаправленный поиск может занять слишком много времени и потерять свое клиническое значение.

Химико-токсикологическое исследование с целью диагностики острого отравления обычно проводится в специальной лаборатории Центра по лечению отравлений. Выполнению этого исследования предшествуют следующие этапы:

1. На догоспиталном этапе на месте происшествия бригада скорой помощи собирает вещественные доказательства отравления, необходимые для химико-токсикологического исследования: медикаменты (порошки, таблетки, ампулы и другие), подозрительные жидкости в содержащей их посуде и др. (в закрытом виде). При промывании желудка у больных с нераспознанным видом отравления необходимо собрать первую порцию промывных вод (100-150 мл) и доставить в стационар.

2. В стационаре сразу же после поступления больного до начала инфузионной терапии (введение растворов) отбирают пробы крови (5-10 мл) и мочи (не менее 50-100 мл). Для предотвращения свертывания в кровь добавляют гепарин (на 5 мл крови - 1 каплю гепарина).

3. Направление на лабораторное исследование. Направленность в поиске какого-либо токсического вещества определяется врачом-токсикологом на основании:

- клинической симптоматики,

- данных инструментальных методов обследования больного (ЭЭГ, ЭКГ, изменениях кислотно-щелочного состояния крови, фибробронхоскопии, рентгенографии легких, пищевода и желудка и др.),

- а также анамнеза и имеющихся вещественных доказательств.

Это необходимо для сужения круга подозреваемых веществ с целью ускорения лабораторного исследования.

Дата добавления: 2014-01-04